脂肪型肉鸡高胆固醇血症发生的机制及染料木黄酮调控的信号通路

Several kinds of metabolic disorder diseases in broiler are related to abormal, such as broiler fatty liver syndrom, ascites syndrom and the sudden death syndrom. Researches about lipid metabolism in broiler were usually focused on fat deposition, instead of paying much attention to the deseases or sub-health state in broiler.One of our researches showed that the plasma total cholesterol ester and low density lipoprotein ester in broilers were 2 and 1 times of more than those in the same age hens. Studies showed that genistein may decrease the plasma total cholesterol in human being, experimental mamals and poultry, but no exact mechanism was found. The applicant will investigate the correlation between abnormal metabolism in cholesterol and LDL-R on the muscle, live,adipose cells and some othe tissue cells with or without genistein modulating by using in vivo and in vitro models to obtain the cell target and the mocular mechanism to regulating the high plasma cholesterol in broilers, from which the diseases would be reduced and the sub-health state would be improved in broilers.

肉鸡的多种营养代谢病与脂肪代谢有很大关系，例如肉鸡脂肪肝综合征、腹水综合征、猝死综合征等，对于肉鸡脂肪代谢的研究多关注于脂肪沉积，对于肉鸡脂肪代谢紊乱引起的肉鸡亚健康或不健康状况研究较少。42日龄肉鸡血浆总胆固醇酯和低密度脂蛋白胆固醇酯分别约是青年蛋鸡的2倍和1倍。研究表明染料木黄酮(genistein，Gen)可以降低人、实验动物甚至鸡的血浆胆固醇浓度，但没有确切调控机制。本课题通过研究脂肪型肉鸡肝脏产生LDL的水平以及肌肉、肝脏、脂肪和其他组织低密度脂蛋白受体（LDL-R）的表达与肉鸡血浆胆固醇浓度的关系，找到调控肉鸡高胆固醇血症的细胞靶点，并用Gen进行调控，通过体外细胞培养实验，使用雌激素受体或酪氨酸受体抑制剂发现Gen调控脂肪型肉鸡血浆胆固醇的部分机制，找到调控肉鸡高胆固醇血症的细胞靶点和营养调控方法，从而改善肉鸡的亚健康状况并有可能提高机体的免疫功能，减小肉鸡养殖上的经济损失。

高胆固醇血症是目前是多种肉鸡营养代谢病发病的必经过程,如肉鸡腹水综合征和心衰猝死，严重阻碍了肉鸡养殖业的发展。我国肉鸡饲养量每年在10～30亿只左右，腹水症发病率约为7%，年经济损失超过30亿元人民币。所以本项目通过检测高血脂情况下营养代谢病的发病情况、血浆相关脂肪代谢参数以及LDL-R在多种组织中的基因和蛋白表达等来研究脂肪型肉鸡在血浆胆固醇正常和偏高情况下胆固醇脂类代谢的情况。通过体内和体外试验，确定染料木黄酮对血浆胆固醇的影响是通过直接调节血浆胆固醇的生成还是通过调节胆固醇的清除渠道实现的，并发现其调节的信号通路。.以上的研究结果证明高能日粮中添加50mg/kg染料木黄酮能提高肉鸡生长性能和屠宰性能，抑制心脏肥大，同时可能是通过降低血清胰岛素和脂蛋白脂酶活性来降低血胆固醇，进而减少肉鸡高血胆固醇相关的疾病。此外高能日粮添加染料木黄酮可以减少肝脏和脂肪组织病变和脂肪沉积，通过调控胆固醇代谢关键因子HMGR、LDLr、CYP7A1、SREBP-2的酶活、蛋白浓度和mRNA表达水平，抑制肝脏胆固醇合成，促进细胞对胆固醇的吸收利用，从而减少肝脏胆固醇含量，减少肝脏胆固醇流出，降低血胆固醇浓度，减少胆固醇在血管沉积，进而抑制心血管相关疾病。体外研究结果进一步解释染料木黄酮缓解降低高脂饮食肉鸡血液胆固醇的机制是通过抑制酪氨酸蛋白激酶活性和上调SREBP-2的表达提高了肝脏细胞LDLR的表达，从而增进了血液中LDL通过LDLR进入肝脏细胞的代谢机制。.根据申请人实验的结果发现，饲料中添加Gen不仅能有效预防腹水综合征的发生，降低血浆胆固醇浓度，而且肉鸡体内Gen的含量很低，远远低于人们日常从食物中摄取的的量，说明饲料中添加Gen不存在残留的问题。此外，Gen可以从大豆中提取、纯化，原料来源成本低廉，而且添加量很小，本项目在部分阐明Gen预防高胆固醇血症机制的基础上，提供了一种有效预防高血脂发生、具有一定应用前景和潜在经济效益的饲料添加剂。