耐顺铂人肺腺癌细胞中miR-451调控PTEN蛋白抗凋亡的研究

非小细胞肺癌(NSCLC)化疗耐药长期困扰着临床治疗，耐药原因涉及基因表达和对基因表达调控的全过程。利用非编码microRNA表达谱的改变预测NSCLC原发性化疗耐药，可以弥补编码基因的不足。我们前期运用microRNA芯片高通量分析技术发现，NSCLC化疗无效组miR-451显著高于有效组171倍，并从化疗有效及无效组的蛋白质差异表达及生物信息学分析，预测出miR-451的耐药靶基因为PTEN。本课题拟采用双向电泳、质谱、Western blotting及荧光素酶报告试验等方法在人肺腺癌耐顺铂细胞株A549/DDP细胞及活体动物水平验证靶基因，探讨miR-451调控PTEN蛋白抗凋亡而参与耐药的机制，旨在为NSCLC临床个体化治疗及逆转耐药的分子靶向治疗提供新依据。

非小细胞肺癌(NSCLC)化疗耐药长期困扰着临床治疗，耐药原因涉及基因表达和对基因表达调控的全过程。利用非编码miRNA表达谱的改变预测NSCLC化疗耐药，可以弥补编码基因的不足。我们前期运用miRNA芯片高通量分析技术从人NSCLC组织中筛选出特异性差异表达的miR-451，并通过细胞和活体动物水平进行了miR-451的功能学验证。结果表明：miR-451在NSCLC中发挥抑癌基因功能；miR-451表达水平降低和NSCLC细胞顺铂耐药表型形成密切相关。通过进一步荧光素酶报告试验、Western blotting及功能学拯救试验证实，RAB14为miR-451下游直接调控的一个功能性靶基因，继而可能通过AKT/mTOR或Ras/Raf/MEK/ERK信号通路调控下游Bcl-2、Bax、Livin、PTEN等凋亡相关基因表达从而参与调控NSCLC细胞的增殖活性及化疗耐药性。本研究通过探讨miR-451调控靶基因参与NSCLC细胞增殖及耐药的机制，旨在为NSCLC临床个体化治疗及逆转耐药的分子靶向治疗提供新依据。