基于TLR4介导NF-κB和MAPKs信号通路研究莪术醇抗肝纤维化作用的机制

Curcuma,ethnic medicine plant and genuine traditional drugs of Guangxi where has the abundant resources,has effets of antitumor, antivirus,antibacteria,anti-inflammation,protecting liver and lowering transaminase.Our previous study found that Curcumol,extracting from Guangxi Curcuma,can not only promote hepatic stellate cells(HSCs) apoptosis and inhibit secretion of many factors,but also affect the structure and secretion of hepatic sinusoidal endothelial cells (HSECs) to prevent liver fibrosis.Thus,we propose that Curcumol can reverse liver fibrosis by influencing HSC and HSEC,and regulating the important targets,cell ultrastructure and secretory function of TLR4/MyD88/NF- kappa B and MARKs signal pathway.Indexes such as NF-κB,ERK,JNK,MARKs and other factors,the cell ultrastructure and secretory function of HSC and HSCE are observed by the methods of immunofluorescence,western blot,RT-PCR and electric mirror to study the effects of TLR4 on the changes of transcription and expression of key molecules in MyD88/NF- kappa B and MyD88/MAPKs signaling pathway.This study will help us clear the molecular mechanism of the formation of liver fibrosis and the relationship between HSEC and HSC which maybe the mechanism of antifibrosis of Curcumol.All above study also can provide more scientific basis for the development and utilization of Curcumol in Guangxi.

广西莪术（简称桂莪术）是广西大宗道地民族药材，具有抗肿瘤、抗病毒、抗菌、抗炎、保肝降酶等作用。前期研究发现桂莪术提取物莪术醇能促进HSC凋亡、抑制分泌和影响HSEC结构、分泌功能。课题组提出“莪术醇能从干预HSC和HSEC两方面参与肝纤维化逆转，并调控TLR4/MyD88/NF-κB、MARKs信号通路的重要靶点及细胞超微结构和分泌功能改变，呈现抗肝纤维化”的假说；利用两种动物模型和两种细胞模型，应用免疫荧光、western blot、RT-PCR、电镜技术等方法，观察NF-κB、ERK、JNK、MARKs等因子和HSC、HSEC超微结构、分泌功能等指标，研究TLR4介导MyD88/NF-κB、MyD88/MAPKs 信号通路关键分子转录与表达的改变及相互的影响，阐明肝纤维化形成的分子机制和HSC、HSEC相互关系，寻找莪术醇抗肝纤维化的作用环节及靶点，为广西莪术开发利用提供更多科学依据。

莪术醇是广西莪术主要活性成分，具有有抗肿瘤、降血脂、保肝、抗炎、利胆、抗氧化、抗血栓等多种功效。前期研究发现莪术醇能促进HSC凋亡及其抑制相关细胞因子分泌和调控HSEC结构。课题组提出“莪术醇能从干预HSC和HSEC两方面参与肝纤维化逆转，并调控TLR4/MyD88/NF-κB、MARKs信号通路的重要靶点及细胞超微结构和分泌功能改变，呈现抗肝纤维化”的假说；拟在动物和细胞模型，应用分子生物学检测技术和电镜技术等方法，研究TLR4介导MyD88/NF-κB、MyD88/MAPKs 信号通路调控HSC、HSEC超微结构、分泌功能的改变，揭示莪术醇抗肝纤维化的作用机制。项目完成了动物和细胞模型的制备以及各组药物干预，完成了各组标本的采集和检测，完成了数据统计和分析。已有13篇相关论文发表，其中国内中文核心期刊收录11篇，SCI收录论文有2篇，获得2018年广西自治区科技进步奖自然科学类二等奖。培养了本学科青年骨干4名。培养了“中医药防治肝纤维化方向”硕士研究生3名，协助培养博士研究生1名。项目取得了如下重要结果：（1）揭示了TLR4在肝纤维化发病中具有重要的调控作用。（2）阐明了莪术醇对NF-κB和MAPKs信号通路的调控作用。（3）明确了肝纤维化发生时HSEC结构的改变、以及莪术醇通过调控HSEC结构抗肝纤维化的分子机制。揭示了莪术醇通过干预TLR4/MyD88/NF-κB、MARKs信号通路呈现抗肝纤维化的作用，为莪术醇防治肝纤维化提供了更全面的实验依据，为抗肝纤维化研究提供了新的靶位点。本项目的实施还培养了一支协同创新的科研骨干团队，一定程度上推进了少数民族地区的人才培养。