基于质量放大原理高通量检测食品中LM的阵列式仿生免疫传感技术研究

针对传感器电极表面敏感膜重复利用率低、稳定性差，难以实现多组分同时分析的几个基础问题，本项目以单核细胞增生李斯特氏菌(LM)为识别分子，通过模仿生物膜上镶嵌纳米金标记的抗体，探讨人工质膜-纳米金抗体镶嵌模型理论；通过天然电活性物质筛选，提高纳米金抗体在质膜中镶嵌强度；通过液态条件下人工质膜与测定水溶液形成的油水界面，分子自组装实现敏感膜上纳米金抗体的固定，并形成抗体的质量放大，极大地提高检测的灵敏度，弥补目前免疫传感器固定化方面的不足；将SPR技术、流动注射、膜片钳与电化学传感技术相结合用于镶嵌模型各项性能的评价和形成机制的探讨，构建新型质量放大型仿生阵列式免疫传感器，实现膜自动再生和样品连续高通量检测，结合核糖体展示技术筛选LM高特异抗体，建立纳米免疫磁颗粒制备新技术，用于LM富集，形成一个高特异、高灵敏及高通量检测技术体系。该课题是多学科交叉的创新性研究，有较好的理论意义和实际价值。

本项目以单核增生李斯特氏菌(LM)为识别分子，研制了面向基因检测的两种压阻式悬臂梁传感器，即硅微悬臂梁传感器和二氧化硅微悬臂梁传感器，通过液态条件下人工质膜与测定水溶液形成的油水界面，分子自组装实现敏感膜上纳米金抗体的固定，并形成抗体的质量放大，极大地提高检测的灵敏度，弥补目前免疫传感器固定化方面的不足；将SPR 技术与电化学传感技术相结合用于镶嵌模型各项性能的评价和形成机制的探讨，构建了新型仿生电化学免疫传感器，并实现了牛奶样品中LM的检测，检测范围为102-106CFU/mL。