基于“中病即止”理论研究电针促进面神经损伤修复的量效关系及SCs自噬的分子机制

"Zhong Bing Ji Zhi" is an important principle in acupuncture treatment，which emphasizes the effective amount of stimulation should be grasped to prevent excessive stimulation or invalid irritation，aiming at alleviating the suffering of patients and saving valuable medical resources．Clinical reports and our preliminary studies have found that electroacupuncture can promote the repair after facial nerve injury，but long duration can lead to damage response．New researches have showed that Schwann cells (SCs) autophagy plays a key role in peripheral nerve injury，but excessive autophagy is detrimental to cells，which may be a new way to interpret "Zhong Bing Ji Zhi"．This study chosing the dominating disease—facial paralysis(facial nerve injury) as the carrier and facial nerve injury in rats as the research object，which starts from the important parameters of constituting the electrical stimulation quantity—intensity，frequency，needle retention time and duration to screening a therapeutically effective amount of stimulation， then we use tissue　morphology，immunohistochemistry，in situ hybridization，PCR，Western Blot and adopt the autophagy inhibitors and GDNF antagonists．From the positive and negative sides, we can analyze the molecular mechanism of SCs autophagy with acupuncture in the repair after facial nerve injury，to provide a scientific basis for clinical application of the classical theory — "Zhong Bing Ji Zhi"．

“中病即止”是针灸治病的重要原则，强调在针刺治疗中应把握有效刺激量，避免刺激过度引起的无效刺激或损伤刺激，旨在减轻患者痛苦，节约宝贵的医疗资源。临床报道和我们的前期研究均发现电针可促进面神经损伤修复，但疗程过长可导致损伤反应。最新研究表明雪旺细胞（SCs）自噬在周围神经损伤修复中起到关键作用，但过度自噬对细胞有害。从面神经损伤后SCs自噬入手可能是阐释“中病即止”科学内涵的新途径。本项目以针灸临床优势病种—面瘫（面神经损伤）为研究载体，以面神经损伤大鼠为研究对象，从构成电针刺激量的重要参数—强度、频率、留针时间和疗程入手，筛选电针治疗本病的有效刺激量，再运用组织形态学、免疫组化、原位杂交、PCR及Western Blot等方法，并采用自噬抑制剂和GDNF拮抗剂，从正、反两面证实SCs自噬及其信号通路在电针促进面神经损伤修复中的分子机制，为中医经典理论—中病即止的临床应用提供科学的理论依据。

周围性面瘫是临床常见病、多发病，给患者容貌和心理造成极大的负面影响。针灸治疗本病疗效确切，是WHO推荐针灸治疗的43种疾病之一，然而针刺治疗该病的有效刺激量及其分子机制尚未阐释清楚。我们前期研究已初步发现刺激疗程与效应不呈正相关，刺激量不当易继发损伤反应。因此，筛选电针治疗本病的有效刺激量，阐释中医“中病即止”理论的研究亟待加强。自噬是机体内存在的一种自我修复、维持生命的过程，与疾病的发生、发展及转归密切相关，越来越多的研究已发现针刺促神经修复作用与自噬水平存在相关性。因此，从雪旺细胞自噬入手，可能是阐释针刺调控面神经损伤修复水平作用机制的重要突破口。.本研究以面神经损伤大鼠为研究对象，筛选出电针治疗本病的有效刺激量，再从影响面神经损伤修复的关键环节—雪旺细胞自噬、GDNF、PI3K-Akt-mTOR 信号转导通路入手，运用组织形态学、免疫组化、免疫荧光及荧光定量 PCR 等方法，同时应用自噬抑制剂和 GDNF 拮抗剂，从正、反两面揭示电针“中病即止”促进面神经损伤修复的分子机制。.本研究从电针刺激参数对周围性面瘫大鼠面神经损伤修复的影响、电针对周围性面瘫大鼠雪旺细胞自噬水平的影响和电针对围性面瘫大鼠 GDNF 和PI3K-Akt-mTOR信号转导通路的影响这三个方面进行研究。.实验结果表明：1.电针刺激可加快面神经损伤的修复过程，但疗效与刺激量大小不呈正相关，电针过度剌激可能会引发损伤反应。2.电针促进周围性面瘫大鼠面神经损伤修复的机制，可能是通过调控自噬相关蛋白及基因的表达，进一步调控雪旺细胞自噬来实现。3.电针可能是通过促进GDNF的分泌，调控PI3K-Akt-mTOR信号通路，进而抑制雪旺细胞自噬，从而促进面神经的损伤修复。