二十味沉香丸"调隆"对卒中后PTSD大鼠脑内GLU/GABA-Gln代谢环路的作用机制研究

post-stroke symptoms of post-traumatic stress disorder (sPTSD) is a common psychiatric disorder, which attracts more attention due to its complication, severity, high morbidity and suicide rate. In China, seldom studies and effective drugs on this disease are developed. In tibetan medicine, this disease is a kind of White veins disease with the imbalance of “long”, and Er shi wei chen xiang wan words well in tranquilizing the spirit by regulating the “long”. According to the previous study, In sPTSD, the imbalance between Glu and GABA is prevalent. The critical to reverse the imbalance is Glu/ GABA-Gln metabolism loop. Therefore, this study replicated and screening the sPTSD rat model, observe the Tibetan classical prescriptions "Er shi wei chen xiang wan " therapeutic effect for treating this disease. In this study, we mainly focus on the changes of GLU/GABA-Gln metabolism circuits in the prefrontal cortex and hippocampus of rats brain and combine the vivo and in vitro experiments as well as the serum pharmacology and molecular biology. apply the techniques including the behavioral science, HPLC,Realtime-PCR, immunofluorescence methods and Westernblot to explore the potency mechanism and main factor related to Tibetan medicine fromentirety-tissue-molecule level, which provides identifiable targets for drug screening, and provides more trains of thought and experiences for ethnic medicine development.

卒中后创伤后应激障碍（PTSD）是一种常见的卒中后精神疾患，因其复杂性、严重性和高自杀率，受到业界越来越多的关注。但是在我国却未受到足够重视，更缺乏疗效肯定、机制明确的治疗药物。藏医认为，该病是白脉病中以“隆”失调为主要病机特点的类型。临床中，常以“调隆”为法，药用二十味沉香丸，疗效卓著。前期研究显示，PTSD存在GLU/GABA稳态失衡的改变，而调节Glu/GABA-Gln 代谢环路很可能是逆转其失衡状态的关键。因此，申请者拟采用在体与离体实验相验证、分子生物学与血清药理学相结合的模式，通过行为学、高效液相色谱法、Rea ltime- PCR等研究技术，从整体—组织—分子的不同角度，研究二十味沉香丸对卒中后PTSD状态大鼠模型脑内Glu/GABA-Gln 代谢环路的调节作用，以期为本病治疗药物的筛选提供可选靶点，更为民族医的临床应用和民族药的开发提供新的思路和可借鉴的经验。

目的：研究二十味沉香丸对卒中后PTSD状态大鼠模型脑内Glu/GABA-Gln 代谢环路的调节作用，以期为本病治疗药物的筛选提供可选靶点，更为民族医的临床应用和民族药的开发提供新的思路。.方法：采用相关分析、频数统计等不同的数据挖掘方法，系统分析了中、藏医治疗脑血管病方面的异同，剖析藏医治疗卒中后PTSD的理法方药体系。.采用社交趋避实验，高架十字迷宫观察不同处理组大鼠的行为改变情况。采通过免疫组织化学法、Western Blot、realtimePCR等实验技术，从突触形态--蛋白—基因的不同层面探讨二十味沉香丸对从GLU/GABA-Gln代谢环路不同环节的调节作用。.结果：理论研究部分：中藏医在治疗卒中后情绪障碍方面，各有特点。中医以补虚安神、行气活血为主。藏医则以复方时辰配伍用药为主。二十味沉香丸中有丁香、藏木香配合肉豆蔻、红花调和隆血，牛黄、珍珠母安神镇静，是调节隆偏盛治疗情绪障碍之主药。.实验研究部分：MACO模型大鼠的社交趋避及高架十字迷宫行为与SPS模型大鼠无显著性差异（P＞0.05）；MACO模型大鼠前额叶皮质和海马脑区GAD1、GAD2、GLT-1、GS的表达与SPS模型大鼠无显著差异（P＞0.05）；给药7day后，模型组大鼠海马脑区GAD1、GAD2、GLT-1、GS的表达与假手术组相比，均有显著下降（P＜0.01），二十味沉香丸，能够提高GAD2、GLT-1、GS的表达。阳性对照药仅对GS的表达影响显著（P＜0.05）；给药14天后，模型组以上指标，与7day差异不显著（P＞0.05）；给药组对GAD2有显著影响（P＜0.05）；前额叶皮质脑区，在给药7day后，二十味沉香丸和阳性对照药均能够显著提高GAD1和GS的表达，但二十味沉香丸作用更明显。给药14day后，阳性对照组GAD2、GLT-1、GS改变显著（P＜0.01），藏药组则对GAD2有改善作用（P＜0.05），这种改变在蛋白和基因层面具有相同的趋势。.结论：综合以上研究成果，二十味沉香丸从调“隆痰”入手，有效改善了模型大鼠的PTSD状态。其内在机制可能在于改善GLU／GABA-Gln代谢环路中蛋白GAD、GS的异常表达，亦可调节GLT转运蛋白的表达，从而影响GLU、GABA的合成和分解，维持GLU/GABA的兴奋／抑制稳态。