BDNF对卒中后抑郁（PSD）大鼠海马神经元保护作用的研究

卒中后抑郁（PSD）存在海马神经元萎缩、细胞凋亡加速、神经元再生障碍等异常，如何有效的保护海马神经元成为治疗PSD的关键。新近研究表明PSD海马损伤与脑源性神经营养因子（BDNF）表达下调有关，所以BDNF是治疗PSD的理想选择。中枢直接注射BDNF会引起神经组织的额外损伤；而BDNF在循环中降解过快和无法通过血脑屏障，使外周静脉注射BDNF很难完成中枢神经的保护效应。为此本课题在前期研究的基础上，利用基因嵌合技术设计并构建能够通过血脑屏障的融合基因-BDNF-穿膜肽（Ant）基因，并将融合基因转入腺相关病毒（AAV）载体中，然后用AAV感染PSD大鼠的鼻粘膜，将融合基因转到鼻黏膜细胞内，形成一个体内小加工厂，持续分泌表达携带有穿膜肽的BDNF-Ant融合蛋白，通过行为观察、病理学方法等来观察BDNF对PSD大鼠治疗作用。期望通过本研究建立有效预防和治疗PSD等精神疾病的方法。

卒中后抑郁（post-stroke depression , PSD）存在神经元萎缩和再生障碍，而这种变化与可能脑源性神经营养因子下调有关。如何通过BDNF有效的保护神经元就成为治疗 PSD 的关键。本课题在前期研究的基础上，首先利用基因嵌合技术设计并构建能够通过血脑屏障的融合基因BDNF-HT2A基因，并将融合基因转入腺相关病毒（ AAV）载体中，通过鉴定、测序与细胞培养证实病毒序列、滴度以及BDNF的表达；随后建立和优化不可预知性慢性温和应激小鼠模型；最后在成功建立小鼠抑郁模型的基础上，进一步通过SD大鼠构建PSD模型，然后用融合基因腺相关病毒感染 PSD 大鼠的鼻粘膜，将融合基因转到鼻黏膜细胞内，形成一个体内小加工厂，持续分泌表达携带有穿膜肽的 BDNF-HT2A融合蛋白，通过行为观察（旷场，强迫游泳和糖水偏好百分比测试）、分子生物学（ELISA法，western-blot法，免疫组织化学法，RT-PCR法）等方法等来探究 BDNF 对 PSD 大鼠治疗作用，期望通过本研究建立有效预防和治疗 PSD 等精神疾病的方法。