柑橘胞质杂种安全高效早期筛选与雄性不育新种质创制

柑橘细胞对称融合再生叶肉亲本型胞质杂种（其核基因组、线粒体基因组分别来自叶肉亲本和愈伤组织亲本）的现象十分普遍，以具有胞质雄性不育特性的温州蜜柑为愈伤组织亲本与有核品种的叶肉原生质体融合，可以获得雄性不育胞质杂种，但其早期筛选困难、再生效率不高。本项目拟以"愈伤组织原生质体（转GFP标记） + 叶肉原生质体"的实验模式，利用柑橘叶肉原生质体不能分化再生和GFP基因（整合在核基因组）只存在于异源四倍体体细胞杂种和愈伤组织亲本再生类型的特点，筛选并培养不带GFP标记的胞质杂种类型；通过对双亲原生质体的线粒体分别转GFP标记（绿色）和特异染色（红色）使其呈色不同，揭示体细胞杂交早期的线粒体互作特点；在此基础上，创造一批二倍体雄性不育胞质杂种。项目的实施将建立起柑橘胞质杂种的安全高效早期筛选体系，具有理论意义；同时将创造一批雄性不育种质，促进我国特色有核品种的无核化遗传改良，具有应用前景。