柑橘体细胞杂种的再生优势及相关机制

以前的经验表明,柑橘等植物体细胞杂种具有再生优势，但该现象一直缺乏直观的实验证据的证实。本项目在获得转GFP（绿色荧光蛋白）基因植株的基础上，以"愈伤组织原生质体+ 转GFP基因叶肉原生质体"的实验模式，利用柑橘叶肉原生质体不能分化再生和GFP荧光只在杂种细胞表达的特点，对杂种细胞分化再生的全过程进行活体筛选和跟踪，以直观的时空实验证据,研究杂种细胞在再生优势方面与亲本细胞的差异及其具体表现形式；并通过实验设计，揭示其再生优势是来自"杂种优势"还是不同类型细胞间的"再生互补"，明确异源线粒体基因组在启动叶肉细胞分裂中的作用；借助单胚PCR-RFLP技术，揭示杂种细胞发育早期到再生成株各个关键时期的胞质遗传组成动态。本项目围绕体细胞杂交领域尚未解决的有关基础性问题开展研究，对未来没有GFP标记条件下的柑橘体细胞杂交研究具有重要的指导意义，同时创造一批有价值的活体材料。