beta-葡聚糖促进髓源性抑制细胞分化作用及其机制研究

髓源性抑制细胞(MDSCs)是抑制机体抗瘤免疫应答的重要细胞，促进MDSCs分化成熟是肿瘤靶向免疫治疗的重要策略。beta-葡聚糖作为生物应答调节剂已被用于肿瘤治疗并取得较好疗效，我们前期研究发现MDSCs表达beta-葡聚糖的受体Dectin-1，beta-葡聚糖在体外可直接促进MDSCs分化，并且beta-葡聚糖可下调荷瘤小鼠MDSCs的数量和功能。由此，我们提出科研假说：beta-葡聚糖可通过促进荷瘤小鼠MDSCs分化、在减少MDSCs的同时增加DC和Mφ，从而增强机体的抗瘤免疫应答。本项目将进一步研究beta-葡聚糖对不同MDSCs亚群的分化作用，明确beta-葡聚糖调控MDSCs分化的受体类型及其下游信号通路，寻找beta-葡聚糖调控MDSCs分化过程中关键性miroRNA及其调控的靶分子。本研究将揭示beta-葡聚糖调控MDSCs分化机制，为肿瘤免疫治疗提供重要的科学理论依据。

本项目探讨β-葡聚糖对髓源性抑制细胞(MDSCs)分化和功能的调控作用，并寻找潜在机制，发现具有临床应用价值的新靶点。.（1）单核型（M）和粒细胞型（G）-MDSCs表面均表达β-葡聚糖受体Dectin-1，颗粒型β-葡聚糖（WGP）能够通过Dectin-1促进M-MDSC分化成熟。研究发现该诱导分化过程是依赖于NF-κB途经的，并且WGP刺激后的M-MDSCs的免疫抑制能力明显降低。给予Lewis荷瘤小鼠口服WGP后，肿瘤的发展进程明显减缓，体内MDSCs显著减少，而DCs和巨噬细胞的比例显著上升，Th1细胞和CTL细胞明显增多，而Treg比例显著减少，且免疫抑制功能明显下调。.（2）荷瘤小鼠G-MDSCs中NFIA表达水平升高，WGP刺激后，NFIA表达明显下降。抑制G-MDSCs中NFIA表达后，可下调其免疫抑制功能。WGP可通过Dectin-1抑制G-MDSCs中NFIA的表达，并且这种作用与c-jun分子有关。将siRNA处理后的G-MDSCs与 Lewis细胞同时注射到小鼠皮下，肿瘤生长明显受到抑制，效应性T细胞明显增加。在肿瘤部位直接注射iNFIA后，肿瘤生长明显减缓，G-MDSCs比例显著下调，效应分子显著减少。.（3）WGP能上调MDSCs中Runx1的表达，Runx1能够促进M-MDSCs的成熟且降低其免疫抑制能力。WGP刺激MDSCs后，miR-9的表达量明显降低，并且miR-9与Runx1存在靶向关系。另外，CREB能够结合到pre-miR-9-1的启动子上，调控miR-9的表达。过量表达miR-9能够明显增强MDSCs的免疫抑制活性，抑制WGP诱导M-MDSCs的分化过程；下调miR-9则可以促进M-MDSCs的成熟，而削弱其免疫抑制能力。抑制了MDSCs中miR-9表达后荷瘤小鼠的肿瘤生长缓慢，小鼠的存活率明显增高；相反地，增加MDSCs中miR-9的表达能够促进肿瘤的生长，显著降低小鼠的存活率。此外，直接注射miR-9抑制剂于小鼠肿瘤局部，也能够达到延缓肿瘤的效果。.上述结果表明，β-葡聚糖既可通过NF-κB途经促进M-MDSCs分化成熟，也可通过c-jun/NFIA分子调控G-MDSCs的抑制功能。此外，β-葡聚糖还可下调MDSCs细胞miR-9表达，通过靶向Runx1来调控MDSCs的分化成熟与功能，进而影响机体的抗瘤免疫应答。.