AP-1相关性microRNA对骨肉瘤转移特性的调节机制及其早期诊断价值研究

影响骨肉瘤预后的主要因素为骨肉瘤的早期转移，但是其机制和分子特征尚未清楚，缺乏早期诊断和预后评价指标。近年来，microRNA在肿瘤转移机制和早期诊断，基因治疗领域上的研究进展为这一问题的解决提供了新的思路。鉴于近年来AP-1转录因子活化决定骨肉瘤转移能力的重要发现，我们准备利用染色质免疫共沉淀技术、生物信息学研究microRNA靶基因网络策略、肿瘤转移体内外研究技术等实验平台，进行系统的microRNA相关骨肉瘤转移机制研究；利用激光显微切割富集microRNA分析的临床样本分析技术、血清microRNA检测的诊断技术等进行其临床应用研究。从而获取合适的肿瘤转移相关microRNA做为骨肉瘤转移的早期诊断和预后评价指标，同时对microRNA调节的骨肉瘤转移机制进行深入研究、探讨，为骨肉瘤转移的早期诊断、临床治疗以及预后评价等领域提出新的研究方向。

影响骨肉瘤预后的主要因素为骨肉瘤的早期转移，但是其机制和分子特征尚未清楚，缺乏早期诊断和预后评价指标。近年来，microRNA在肿瘤转移机制和早期诊断，基因治疗领域上的研究进展为这一问题的解决提供了新的思路。鉴于近年来AP-1转录因子活化决定骨肉瘤转移能力的重要发现，我们从芯片数据中选取相关低表达基因miR-143进行功能学研究。通过细胞培养、RNA抽提、RT-PCR、转染、western blot检测、细胞增殖实验（MTT）、凋亡分析等一系列实验方法，发现miR-143在骨肉瘤细胞及组织中呈低表达、miR-143可以促进骨肉瘤细胞凋亡，抑制骨肉瘤细胞增殖活性、并且miR-143靶向抗凋亡分子Bcl-2发挥作用，从而得出结论：骨肉瘤中低表达基因miR-143通过靶向抗凋亡分子Bcl-2促进细胞凋亡、抑制细胞增殖。同时从芯片数据中选取相关高表达基因PAK3进行功能学研究，发现PAK3 mRNA及蛋白在骨肉瘤细胞株中高表达、转染PAK3 siRNA的骨肉瘤细胞株U-2OS细胞凋亡百分比增加，肿瘤细胞生长速度受到抑制、骨肉瘤细胞株U-2OS中敲除PAK3可以抑制了ERK活性、抑制ERK可以诱导骨肉瘤细胞株U-2OS凋亡，从而得出结论：PAK3以影响ERK活性为中介，在骨肉瘤的发病机制中起到抑制肿瘤细胞凋亡、促进肿瘤细胞生长的作用。通过此项研究我们可获取合适的肿瘤转移相关microRNA做为骨肉瘤转移的早期诊断和预后评价指标，同时对microRNA调节的骨肉瘤转移机制进行深入研究、探讨，为骨肉瘤转移的早期诊断、临床治疗以及预后评价等领域提出新的研究方向。