雌激素受体GPR30内吞调节机制及其在皮肤衰老过程中的作用研究

The clinic and basic research revealed estrogen and its receptor play a role in skin aging. The previous researches showed novel estrogen receptor GPR30 decreased in UV/H2O2 induced aging; upregulating its efficiency would delay the light and oxidative stress induced aging. We recently found UV/H2O2 would promote GPR30 internalization (from membrane to plasma) and the internalizing related kinase GRK2 increased. The results prompt GRK2 induced internalization may be the starter of UV/ UV/H2O2 induced GPR30 descend and cell aging. In the research, we determine the effect of GPR30 in skin aging by skin sample in different age and UV/ UV/H2O2 induced aging model; using gene slicing technology ect, we investigate GRK2 regulate GPR30’s phosphorylation and related internalization play a role in UV/H2O2 induced aging. Finally, we determine the effect of GPR30 in skin aging using GPR30 ko mice. These researches ultimate purpose are affirming the effect of GPR30 in skin aging and its mechanism, that find a novle mechanism for estrogen effect and make a new target for estrogen medicine explore.

临床及基础研究显示雌激素及其受体在皮肤衰老病理生理过程中起关键作用。前期研究显示，新型雌激素受体GPR30在UV/H2O2诱导的皮肤衰老模型中表达下降；其活性的增加，延缓光和氧化应激诱导人成纤维细胞的老化。我们近期研究发现UV/ H2O2可引起GPR30内吞（细胞膜向胞浆内转移）以及内吞相关激酶GRK2表达增加，提示GRK2介导内吞可能是UV/H2O2诱导的GPR30表达下降及细胞衰老的始动环节。本研究中，我们采用不同年龄人皮肤样本及UV/H2O2诱导衰老细胞模型明确GPR30在皮肤衰老中的作用；再利用基因沉默技术等探讨GRK2通过调控GPR30的磷酸化介导其内吞影响UV/ H2O2诱导的衰老；最后利用GPR30基因敲除鼠在体内验证GPR30在皮肤衰老中的作用。本研究的最终研究目的在于明确GPR30在皮肤衰老中的作用及机制，为寻找新的雌激素作用机制，开发新类雌激素抗衰老药物提供靶点。

衰老是发生于不同器官和系统的一系列特定变化复杂过程。而皮肤衰老是人体整个机体衰老最直接的表现，临床及基础研究显示雌激素及其受体在皮肤衰老病理生理过程中起关键作用。GPR30作为一种新型的雌激素受体，广泛表达于人体正常组织，在生殖系统、神经系统、心血管系统和肿瘤发生中都发挥重要的调控作用。.本项目在研究中发现GPR30在UV/H2O2诱导的皮肤衰老模型中表达下降；上调GPR30的表达量/活性可延缓氧化应激诱导人皮肤成纤维细胞的衰老；抑制GPR30的活性可部分下调雌二醇对人皮肤成纤维细胞衰老的保护作用，提示GPR30在皮肤衰老中起保护作用，而雌二醇对皮肤衰老的保护作用部分通过GPR30发挥。同时我们发H2O2刺激促进GPR30的内吞（细胞膜向细胞浆内转移）；当抑制内吞相关激酶GRK2表达时，在氧化应激细胞衰老模型中GPR30内吞受到抑制且GPR30总体表达可见明显上升；敲降GRK2可抑制激活GPR30产生的衰老保护作用。以上提示内吞相关激酶GRK2可能是介导氧化应激细胞衰老模型中GPR30内吞及GPR30延缓细胞衰老的重要环节。当抑制ERK的激活后，我们发现激活GPR30出现的衰老保护作用被抑制，这提示GPR30内吞后通过激活MAPK/ERK途径发挥延缓衰老的作用。.本研究明确了雌激素新型受体GPR30内吞调节机制及其在皮肤衰老过程中的作用，揭示了新的雌激素延缓衰老作用机制，开发新类雌激素抗衰老药物提供靶点。