脑内抗原提呈细胞在实验性自身免疫性脑脊髓炎病程变化中的作用及其调控机制

实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）是研究人神经系统免疫性疾病多发性硬化（MS）的动物模型。EAE的诸多研究提示脑中的树突状细胞（DC）和小胶质细胞对EAE的发病及病程转归有着密切联系，但尚无统一结论。本项目以前期研究发现脑基质细胞能够诱导成熟DC分化为具有负向调节功能的小胶质样细胞为基础，提出神经系统微环境能促进脑内抗原提呈细胞（APC）的再发育，脑内APC主要成分DC和小胶质细胞在脑微环境作用下功能的动态变化可能是影响EAE的病程进展和转归的重要因素。本研究将采用体外脑基质/DC或小胶质细胞相互作用模型和体内单核/DC过继回输模型，研究DC及小胶质细胞在EAE各疾病进程中的功能变化，分析DC和小胶质细胞的不同功能状态对自身反应性T细胞的功能影响以及与疾病进展和转归的关系。本研究试图从中枢神经系统中APC亚群功能的变化来揭示EAE的疾病进展和转归的机制，为MS的预防和治疗提出新的思路。

实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）是研究人神经系统免疫性疾病多发性硬化（MS）的动物模型。MS患者和EAE动物发病后存在自我缓解的现象，表明中枢神经系统（CNS）存在负向免疫调控作用，但关键的启动细胞和作用机制不明。抗原提呈细胞（Antigen presenting cell,APC）被认为在调控机体免疫反应中发挥核心作用。小胶质细胞是CNS中唯一定居的免疫细胞，被认为是潜在的APC，是否参与CNS的免疫调控还未见明确报道。本课题利用MOG35-55诱导的C56BL/6小鼠制备EAE模型，结果显示EAE模型小鼠高发期的小胶质细胞的数量明显上升，细胞形态表现为活化状态，且共表达MHC-II分子和负向免疫调控PD-L1；同时CD4+T细胞的数量也明显增加，表达负向共刺激分子PD-1增加，且二者形态学共定位，表明小胶质细胞具有免疫抑制功能的潜力；分选自EAE高峰期的小胶质细胞可通过诱导Treg，释放NO发挥抑制抗原特异性CD4+T的增殖，抑制Th1细胞的分化作用，但对Th17细胞无影响。体外阻断PD-L1分析其对小胶质细胞抑制功能的调控作用，结果显示PD-L1主要通过促进小胶质细胞分泌NO来抑制T细胞的增殖，减少Th1细胞的分化；但PD-L1不参与小胶质细胞诱导Treg的过程。本课题明确了作为抗原提呈细胞的小胶质细胞可通过PD-L1分子发挥免疫抑制作用，为一步开展CNS负向免疫调控机制的基础研究提供了理论依据，可为将来治疗CNS自身免疫疾病提供新的干预或/作用靶点。