M1/M2枯否细胞极化调控肝纤维化的机制：肝纤维化治疗新策略

Kupffer cells, the resident macrophage in the liver, are reemerging as critical mediators of both liver injury and repair for tremendous plasticity (proinflammatory M1 or restorative M2 phenotype). Our previous study has demonstrated that activated HSC promote ECM and collagen accumulation and lead to liver fibrosis. We suppose that whether restraining M1 macrophage polarization and/or favoring the M2 macrophage phenotype may protect against liver fibrosis. Therefore, we investigate the impact of M2 KC polarization on M1 KC in vitro and in vivo. Meanwhile, we evaluate the relationship between M1/M2 ratio and liver stiffness to explore macrophage-related markers used to discriminate liver no/ mild fibrosis from cirrhosis in patients.

肝脏固有巨噬细胞-枯否细胞（KC），因其高度可塑性（M1/M2型）成为肝损伤和修复中至关重要的调节介质，也是近年肝纤维化研究的热点。在前期研究中我们证实，HSC活化可促进细胞外基质和胶原合成，促进肝纤维化的发展。那么限制致炎性M1型KCs功能，同时/或促进修复型M2型KCs的极化是否可减轻或逆转肝纤维化，这在国内外鲜有报道。本研究拟通过慢病毒载体过表达及siRNA敲除等方式极化M1/M2型KC，观察M2极化是否可诱导M1凋亡，并在体内试验进一步证实。同时评估不同程度肝纤维化中M2型KCs极化数量及M1型KCs凋亡数量之间的关系，探讨枯否细胞在肝纤维化中的作用机制，找出对肝纤维化有评估价值的诊断指标。

肝脏固有巨噬细胞-枯否细胞（KC），因其高度可塑性（M1/M2型）成为肝损伤和修复中至关重要的调节介质，也是近年肝纤维化研究的热点。本课题通过收集慢性乙型肝炎与乙型肝炎肝硬化外周血及肝脏组织标本，发现慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞可能以向M1方向极化为主，iNOS可能参与了慢性乙型肝炎的慢性化发展过程；在乙型肝炎肝硬化患者体内，巨噬细胞可能同时向M1/M2方向极化，但以向M2方向极化为主；CD163与乙型肝炎肝硬化发生发展密切相关，其可能是预测其预后及评价病情严重程度的重要指标。动物实验中，应用BALB/C小鼠构建CCL4肝纤维化模型，并给予白藜芦醇进行干预，观察肝纤维化模型肝脏中枯否细胞的极化及平衡对肝纤维化形成的影响及机制；体外实验中，建立体外炎症巨噬细胞模型，验证M2型诱导剂及M2型条件培养基对M1型巨噬细胞细胞的再极化作用。本项目通过对人体、动物模型及体外细胞实验研究，发现 M2诱导剂通过促进NF-κB1转录因子的表达，调控下游ERK的转录水平，导致下游的IL-10表达显著增加，使组织微环境向抗炎方向转变，促进巨噬细胞M1向M2表型极化，促进组织修复，阐明了M1/M2型KCs的极化及平衡对肝纤维化发生发展的影响机制，揭示了肝纤维化发生发展的新机制，具有重要的科学意义，对早期进行预防和逆转肝纤维化，阻断“慢性肝炎－肝纤维化－肝硬化－肝癌”的演变过程具有重要的应用前景。