CAMTA2基因遗传变异的功能研究及其与高血压左室肥厚的关联性分析

高血压左心室肥厚的机制复杂，迄今尚未阐明。CAMTA2（calmodulin binding transcription activator 2）基因是新近报道的与高血压左心室肥厚相关的基因，我们推测CAMTA2基因的单核苷酸多态性（SNP）可能影响其功能，从而影响高血压左室肥厚的遗传易感性。该基因共有两个标签SNP，一个位于启动子区，一个位于编码区并引起氨基酸改变。因此，本研究首先通过报告系统分析研究位于启动子区的SNP对其表达的影响、利用Pull down、激光共聚焦、Morpholinos和Western blot等技术观察引起氨基酸改变的SNP对心肌细胞肥厚表型的影响，然后在两个独立的大样本中分析这两个SNP与高血压左室肥厚的关联性。从而阐明CAMTA2单核苷酸多态性与高血压左室肥厚的相关性及其分子机制。为高血压左室肥厚的早期预警、药物靶点和个体化用药提供线索。

高血压左心室肥厚的机制复杂，迄今尚未阐明。CAMTA2（calmodulin binding transcription activator 2）基因是新近报道的与高血压左心室肥厚相关的基因，该基因共有两个标签SNP，其中rs238234位于编码区并引起氨基酸改变（267 pro→Ala）。本研究首先在一个大样本病例对照研究中分析rs238234与高血压左室肥厚的关联性，结果显示在高血压左室肥厚人群中，rs238234野生型等位基因携带者左室后壁厚度大于rs238234突变型等位基因携带者。然后观察rs238234对CAMTA2 激活ANF 启动子的影响，将携带SNP rs238234不同基因型的CAMTA2 全长开放读码框（ORF）构建到真核表达载体pCMV6中，测序验证、纯化后分别与携带ANF启动子的pGL3 basic报告质粒共同转染到H9C2心肌细胞系中，比较不同基因型直接ANF受激活的程度。结果显示，携带有突变型基因的CAMTA2激活ANF-promoter Luciferase reporter的能力显著下降（P<0.001）。进一步观察不同基因型CAMTA2对心肌细胞肥厚表型的影响，将CAMTA2野生型和突变型基因，克隆到pDC316载体，并包装腺病毒，分别转染新生大鼠心肌细胞。结果显示，转染Ad-CAMTA2野生型基因的细胞面积明显大于转染Ad-CAMTA2突变型基因的心肌细胞（P<0.0001）。提示CAMTA2 mRNA编码区的936位 GCT → CCT（rs238234，蛋白质序列267位 A [Ala] → P [Pro]）突变能够抑制CAMTA2对心肌细胞肥大的调节作用。从而推测CAMTA2基因rs238234影响高血压左室肥厚的遗传易感性。