高血压AT1受体信号通路的miRNAs调控机制及平肝潜阳方药作用的研究

MicroRNA是基因调控网络的关键节点，其多靶向交互性的网络调控特点从本质上切合中医"整体观"的思想。以证候特异性miRNAs为靶点研究其在疾病不同证型病理发展的调控机制更易从基因水平揭示证候实质。高血压是多因素复杂性常见病，肝阳上亢是该病的主要中医证型，我们前一项目的研究表明，AT1受体信号通路是该病证病理调控机制的关键通路。本项目拟从临床筛选高血压肝阳上亢证患者的特征表达基因谱，分析其可能的靶标miRNA；合成靶标miRNA及其反义序列，采用动物注射和细胞转染方法，分别从整体和细胞水平验证miRNA对血压调节及血管平滑肌细胞功能的调控作用，并考察miRNA对AT1受体信号通路的调控作用；在此基础上观察平肝潜阳方对miRNA调控机制的干预作用。以期发现调控高血压肝阳上亢证的miRNA新靶点，并阐释平肝潜阳方治疗高血压可能的miRNAs调节机制，为高血压肝阳上亢证本质的探索提供科学依据。

MicroRNA是基因调控网络的关键节点，其多靶向交互性的网络调控特点从本质上切合中医“整体观”的思想。以证候特异性miRNAs为靶点研究其在疾病不同证型病理发展的调控机制更易从基因水平揭示证候实质。高血压是多因素复杂性常见病，肝阳上亢是该病的主要中医证型，我们前一项目的研究表明，AT1受体信号通路是该病证病理调控机制的关键通路。本项目对高血压肝阳上亢证模型大鼠血浆microRNA谱进行分析验证，筛选出特异表达症候相关6个microRNAs，在miRDB、David、Targan等数据库上对这几个microRNA的靶基因及其调控的信号通路功能进行分析，结果主要与细胞增殖、凋亡有关。进一步首次验证miR-19b-3p调控血管平滑肌细胞增殖的靶基因是Zmynd11，并在原代大鼠血管平滑肌细胞上研究miR-19b-3p细胞增殖和凋亡的作用，是通过调控AT1/Src/FAK/P38MAPK信号通路实现的，采用以方测证的方法，应用平肝潜阳复方作用高血压肝阳上亢证模型动物，可以明显降低血压，降低血浆miR-19b-3p的水平，干预AT1/Src/FAK/P38MAPK信号通路。本项目对高血压中医症候的血浆microRNA谱进行研究，明确了microRNA作为症候诊断分子靶标的可行性，为中医症候研究和中药复方作用机制研究提供了microRNA的新靶点。同时本项目研究了miR-19b-3p对血管平滑肌细胞增殖的调控作用机制及其作用靶点，为阐明高血压所致的血管平滑肌细胞增殖的分子基础提供新的机制途径。