巨噬细胞移动抑制因子在糖皮质激素治疗急性呼吸窘迫综合征中的作用

急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是临床最危重的脏器并发症之一，糖皮质激素(GC)因具有抗炎作用而长期用于治疗该症，但常规剂量多不能取得良好疗效，大剂量则会产生严重副作用。目前已发现巨噬细胞移动抑制因子(MIF)能拮抗GC的抗炎作用，且与ARDS发病相关，可能是影响GC治疗ARDS效果的关键因子，但MIF与GC相互作用的机制尚未阐明。我们在前期已证实MIF拮抗GC抑制脂质炎症介质释放，现拟通过MIF基因敲除或给予外源性MIF刺激，研究MIF对GC三条抗炎经典信号通路(NF-κB、MAPK、Annexin-cPLA2)上关键蛋白和转录因子的影响及其终末效应的变化,并进一步在LPS诱导的ARDS小鼠上验证。上述研究有助于阐明ARDS时MIF抵抗GC作用的细胞内机制，为临床改善GC治疗ARDS效果、减少用量提供新的干预靶点。

既往研究发现巨噬细胞移动抑制因子(MIF)能拮抗糖皮质激素（GC）的抗炎作用，且与ARDS发病相关，可能是影响GC治疗ARDS效果的关键因子，但MIF与GC相互作用的机制尚未阐明。糖皮质激素能诱导抗炎蛋白Annexin 1的表达，通过Annexin 1-cPLA2α-PGE2/LTB4途径发挥抗炎作用，本项目旨在研究MIF拮抗糖皮质激素抗炎作用是否与Annexin 1相关。通过研究发现小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7经LPS刺激后Annexin 1表达减少，然而预先给予糖皮质激素类临床制剂地塞米松（Dex）孵育细胞，或Dex孵育细胞后再用LPS刺激，Annexin 1的表达显著增加。进一步用RNA干扰的方法减少内源性MIF的表达后，无论是否用Dex孵育，均可增加RAW264.7细胞表达Annexin 1，但加入外源性重组MIF后，上述Dex增强Annexin 1表达的作用就被逆转。此外，外源性重组MIF还能逆转Dex对Annexin1下游蛋白cPLA2α活化的抑制作用，而内源性MIF表达减少的细胞能够增强Dex抑制cPLA2α磷酸化的效果。RAW264.7用MIF和LPS刺激以后，细胞中脂质炎症介质PGE2和LTB4的产生明显增加，Dex能明显减少PGE2和LTB4的产生，然而加入外源性重组的MIF以后就可以逆转Dex的作用，若抑制内源性MIF表达则会增强Dex对 PGE2和LTB4产生的抑制作用。根据上述研究结果，我们认为在小鼠腹腔巨噬细胞系RAW264.7中，MIF通过抑制抗炎蛋白Annexin 1的表达负向调节糖皮质激素抑制脂质炎症介质PGE2和LTB4的产生。Annexin 1作为MIF和糖皮质激素之间作用的关键性蛋白，有望成为治疗炎症性疾病的新靶点。