从DAG-PKC-MAPK通路探讨归芍地黄汤对脉络膜新生血管膜抑制作用的机制

AMD is the main reason which grows blind in the world. With the popolational aging,its disease rate razed up year by year.Guishaodihuangtang is the effective medical prescription to cure age related macular degenaration for 10 years by us.In the clinical and empirical study before,it showed favourable curative effect to restrain CNV of AMD through decreased VEGF,bFGF and VEGF/PEDF and incredsed PEDF but mechanism isn't clear.The study revealed the Signal Transduction access of DAG-PKC-MAPK-NF-κB possesses improtant effect in CNV forming.Based on the study before，we build the CNV animal models interfered with Guishaodihuangtang firstly.Obserbe the express of DAG-PKC-MAPK-NF-κB Signal Transduction access through FFA, OCT, immunohistochemisty,Elisa,Western blot,RT-PCR,and so on.On account of molecular signal transduction and gene expression level，to study the the mechanism of action of Guishaodihuangtang and the target point of depressant effect on CNV.

AMD是世界性致盲的主要原因之一，随着人口的老龄化，其发病率逐年增高。归芍地黄汤是我科在临床AMD防治中使用近10 年的验方，前期临床及实验研究发现该方对抑制AMD的CNV具有良好的疗效，对于半导体激光诱导的兔CNV动物模型可以促进其VEGF、bFGF的下调， PEDF的上调，调节二者比例，使得CNV消退。但具体机制不明。最新资料显示，DAG-PKC-MAPK-NF-κB信号传导通路在CNV的形成过程中具有重要作用，本课题拟在前期研究的基础上，通过诱导大鼠CNV动物模型形成，采用归芍地黄汤对CNV进行干预，运用FFA、OCT活体影像学检测及免疫组化、Elisa、Western blot、RT-PCR等方法观察DAG-PKC-MAPK-NF-κB信号传导通路的表达，从分子信号传导及基因表达水平探索归芍地黄汤对CNV抑制作用的靶点，从而诠释其防治AMD的新的作用机制。

AMD是世界性致盲的主要原因之一，随着人口的老龄化，其发病率逐年增高。归芍地黄汤是我科在临床AMD防治中使用近10 年的验方，前期临床及实验研究发现该方对抑制AMD的CNV具有良好的疗效，对于半导体激光诱导的兔CNV动物模型可以促进其VEGF、bFGF的下调， PEDF的上调，调节二者比例，使得CNV消退。但具体机制不明。.最新资料显示，DAG-PKC-MAPK-NF-κB信号传导通路在CNV的形成过程中具有重要作用，本课题在前期研究的基础上，通过诱导大鼠CNV动物模型形成，采用归芍地黄汤对CNV进行干预，运用FFA、OCT活体影像学检测及免疫组化、Elisa、Western blot、RT-PCR等方法观察DAG-PKC-MAPK-NF-κB信号传导通路的表达，实验结果：1.根据眼底照相、OCT、FFA检查表明532nm激光造模后2周CNV模型造模成功。模型组视网膜上VEGF、bFGF、NF-κBp65过度表达，PEDF下降；视网膜脉络膜中DAG、PKC、p38MAPK的表达升高。DAG-PKC-MAPK-NF-κB信号传导通路在CNV发生、发展中起了重要的作用，其可以作为评价CNV动物模型造模成功的指标，为探讨CNV的发病机理并为进一步研究本病有效的治疗方法奠定基础。2.中药可以抑制激光诱导的CNV动物模型中CNV的形成，抑制机制与DAG-PKC-MAPK-NF-κB信号传导通路有相关性。归芍地黄汤、PDT治疗可下调本实验CNV动物模型视网膜VEGF、bFGF、NF-κBp65、DAG、PKC、p38MAPK表达，上调PEDF表达，中药联合PDT的治疗效果优于单纯中药或单纯PDT的治疗效果。调节机制与DAG-PKC-MAPK-NF-κB信号传导通路有相关性。.本研究从分子信号传导及基因表达水平探索归芍地黄汤对CNV抑制作用的靶点，从而诠释了其防治AMD的新的作用机制。