银蓝调脂胶囊调控PXR/CYP3A4表达治疗痰浊血瘀型高脂血症机制和药效物质研究

Diagnosis and treatment of hyperlipidemia by traditional Chinese medical theory usually lies in phlegm turbid and blood stasis, while the connection and scientific content of them has not been thoroughly and systematically investigated. In the process of developing Yinlan Lipid regulating capsule—a TCM new drug treating hyperlipidemia based on stasis and sputum clearing effects, the applicant discovered that this preparation showed good regulatory activity for PXR/CYP3A4 pathway, which may probably be the key to its hyperlipidemia therapy; at the same time, the above mentioned pathway had obvious influence on inflammation, glycolipid and energy metabolism, that might be an important ground for explaining scientific nature of phlegm turbid and blood stasis. This project intended to clarify components which affect PXR/CYP3A4 and their dose-effect relationship by the help of computer assisted target affiliation prediction, metabolite-based active compound screening, UHPLC/TOF/MS metabolomic research; then, through evaluating accumulation and dynamics of such components in the preparation and the body, to confirm quality markers for treating phlegm turbid and blood stasis type hyperlipidemia. Finally, by an in-depth investigation on mechanism and material basis for Yinlan’s hyperlipidemia therapy through regulation of PXR/CYP3A4 expression, scientific nature of phlegm turbid and blood stasis theory for hyperlipidemia therapy, as well as precise, effective and quantitative evaluation of such therapy will be discovered.

中医常用痰浊血瘀辨识高脂血症，但对二者之间的联系与科学内涵并未有深入、系统的研究。在研发祛瘀化痰型调血脂中药新药银蓝调脂胶囊（以下简称银蓝）的过程中，申请人发现，该制剂对PXR/CYP3A4表达具有较好的调控活性，可能是其治疗高脂血症的关键；同时上述通路对炎症、糖脂和能量代谢有明显影响，可能是解释痰浊血瘀理论科学性的重要依据。本项目拟采用计算机辅助靶标亲和活性成分预测、基于代谢产物的靶标亲和活性筛选、UHPLC/TOF/MS代谢组学等研究方法，明确银蓝中影响PXR/CYP3A4的成分及其量效关系及其与痰浊血瘀之间的关联性；进而通过研究上述成分在药物和生物体内的蓄积与运动情况，确定银蓝发挥祛瘀化痰功效的质量标志物。通过深入研究银蓝通过影响PXR/CYP3A4表达实现祛瘀化痰功效的机制和物质基础，最终阐明痰浊血淤理论在高脂血症辨证施治上的科学性，同时精准、高效、可量化地评价银蓝的相关功效活性。

本项目对银蓝调控PXR-CYP3A4信号通路治疗痰浊血瘀型高脂血症的机制和药效物质进行了深入、系统的研究。在明确银蓝对PXR-CYP3A4的调控机制基础上，项目负责人根据质量标志物研究的基本理论、方法和技术，对银蓝的化学成分进行筛选，通过研究这些成分对PXR-CYP3A4的调控能力，在药物中的含量以及药代动力学参数，找到了多个银蓝方中表征其高脂血症治疗功效的质量标志物，并对其归属药味、具体作用和含量控制限度等进行了深入研究。同时，项目负责人对银蓝影响下高脂血症相关的重要内源性代谢物进行了研究，通过质谱检测和代谢组学分析，确定了多个关键代谢标志物，并将这些内源性成分与PXR-CYP3A4-ABCB1关键靶标的表达变化相关联，并最终建立与痰浊血瘀型高脂血症病程的关系。代谢组学研究结果表明，银蓝能够通过调控PXR-CYP3A4-ABCB1信号通路较好地治疗痰浊血瘀型高脂血症，并且对FXR-SHP-CYP7A1通路也具有较强的调控活性，上述多个关键代谢物的水平能够同时表征上述两条通路的活性和表达变化情况。基于此，项目负责人更加深入分析、整理相关研究成果并与中医经典论述比对，初步发现银蓝更适宜于治疗痰湿浊阻型高脂血症，该分型符合目前中医相关经典类别。提示银蓝的中医功效生物学基础、调控机制和药效物质仍需要进行更加全面、深入、系统的研究，以进一步解释其多靶点，多通路，整体性发挥治疗作用的机制。本项目取得了较好的科学和社会效益，共发表科研论文5篇，，培养硕士研究生2名（详见“研究成果”部分）。此外，项目负责人及研究团队在降血脂机制研究和筛选银蓝治疗高脂血症药效物质的过程中发现，方中重要药味绞股蓝能够通过调控PXR的活性促进能量代谢和蛋白质合成，并一定程度调控炎症反应，上述综合功效在降血脂的同时可以较好地促进拉伤骨骼肌的再生，具体机制及相关药效物质正在研究中。综上所述，本项目明确了银蓝通过调控PXR-CYP3A4通路治疗高脂血症的机制和药效物质，相关研究成果符合预期，并为下一阶段深入、全面的研究提供了科学基础。