sLRIG1抑制多酪氨酸激酶受体及胶质瘤细胞生长的作用和机制

以酪氨酸激酶受体（RTK）为靶向的抗肿瘤治疗是目前人脑胶质瘤治疗研究的前沿。多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1（LRIG1）是近年发现的一种内源性的多RTK抑制剂，具有广泛的抗肿瘤应用前景。申请者在国外的博士后研究中发现LRIG1的胞外段，即可溶性LRIG1（sLRIG1）可以生理性地从细胞表面脱落，并抑制相邻细胞的表皮生长因子受体（EGFR）信号和生长增殖。本项目拟研究sLRIG1是否也是一种多RTK抑制剂，即除了抑制EGFR，是否还抑制ErbB2、PDGFR、Met、Ret等其它RTK信号，并研究sLRIG1是否在人脑胶质瘤组织中生理性分泌、是否抑制人脑胶质瘤细胞的生长增殖及其可能的机制。由于sLRIG1可能是一种多RTK抑制剂，比全长的LRIG1分子量小，具有易于制作、易于局部给药、不需要亚细胞定位的优点，从而比LRIG1具有更大的应用前景，更有可能成为治疗人类肿瘤的新方法、新靶点。

本项目主要研究sLRIG1蛋白在胶质瘤细胞中是否为一种多受体酪氨酸激酶（RTK）抑制剂，即除了已知的EGFR，sLRIG1是否还抑制ErbB2、PDGFR、PDGFR或Met受体（这些受体均属于RTK）中的一个或多个，如获得阳性结果，则进一步确定sLRIG1与这些受体的作用方式是否为直接结合，并证明sLRIG1抑制人脑胶质瘤细胞的机制与其抑制肿瘤细胞的RTK信号有关。课题组按研究计划执行了项目。结果表明sLRIG1蛋白在胶质瘤细胞中可抑制PDGFR、PDGFR和Met受体的表达和下游信号，从而证实了sLRIG1蛋白在胶质瘤细胞中是为一种多RTK抑制剂，并进一步确定sLRIG1抑制PDGFR、PDGFR和Met的作用方式为物理性直接结合。证实sLRIG1对离体培养的胶质瘤细胞具有良好的抑癌效应，其机制与抑制肿瘤细胞的PDGFR、PDGFR或Met信号有关。本项目还成功制作可商业化的sLRIG1蛋白。本项目研究结果为临床运用sLRIG1治疗胶质瘤奠定了一定的理论基础。. 课题组未对计划中提到的ErbB2展开研究。因为PDGFR、PDGFR及Met的阳性研究结果已经证实sLRIG1是一种多RTK抑制剂，已经达到了项目的研究目的。. 为了解sLRIG1蛋白对其它细胞膜蛋白的相互作用，课题组增加噬菌体展示的实验内容。应用噬菌体展示技术筛选到了与sLRIG1蛋白相互作用的酮戊二酸脱氢酶样蛋白（OGDHL)、真核细胞翻译起始因子2C1 (EIF2C1)、细胞周期蛋白M3（cyclin M3）、可溶性凝集素半乳糖苷8（LGALS8）、特异性双磷酸酶6（DUSP6)、乙醇脱氢酶1B （ADH1B）、胞质动力蛋白轻链（DYNLL2)、玻连蛋白（VTN）、高迁移率组蛋白（HMGN2）等12个蛋白。这些实验为深入研究sLRIG1蛋白间（包括RTK蛋白）的相互作用提供了依据。. 本项目共发表期刊论文4篇（其中SCI论文1篇、中华杂志论文1篇、统计源期刊论文2篇），中华医学会会议论文1篇。培养博士研究生2名（均在读），硕士研究生2名（其中毕业1名，在读1名）。另有2篇论文整理发表中，均拟投SCI。