基于菌群特征研究湿热型与寒湿型泄泻腻苔形成机制

Tongue diagnosis is a unique diagnostic methods of Trditional Chinese Medicine. The tongue coating is the window to detect the physiology and pathology of human viscera especially the spleen and stomach and is one of the important basis in speculating the severity and outcome of disease.While,because of too macroscopic and non-objective of inspection diagnosis of Traditional Chinese Medicine,the mechanism of tongue coating of microecology has become the front line and extensive areas to be studies of diagnostics of Traditional Chinese Medicine. The project chooses greasy coating coming from 60 cases of damp-heat type and 60 cases of cold-dampness type diarrhea as observation group and 60 cases healthy people with thin coating as control group which reflects specifically the statement of “ the tongue is the exterior of spleen and the tongue coating is the proof of the stomach’s physology and pathology.”The purpose of the project is to provide modern scientific experimental basis for tongue diagnosis of traditional Chinese medicine using modern micro-ecological technology tostudy the characteristics of oral microflora from greasy coating of damp-heat type and cold-dampness type diarrhea accotding to te flora structure of greasy coating and thin coatin,abundance change, physiological characteristics and interaction,to explore the mechanism of greasy coating, and further explain the relationship between the characteristics of tongue coating and TCM syndromes.

舌诊是中医独具特色的诊断方法。舌苔是窥测人体脏腑特别是脾胃生理、病理变化的“窗口”，是中医推测疾病轻重转归的重要依据之一。随着现代科学技术的发展及其向中医学领域的渗透，基于舌苔微生态的舌苔形成机制成为了中医诊断学研究的前沿和待研究的广泛领域。本项目拟针对最能体现“舌为脾之外候，舌苔乃胃之明证”的湿热与寒湿型泄泻患者腻苔为研究对象（筛选黄白腻苔各60例及常人薄白苔60例），采用现代微生态技术，针对黄白腻苔和薄苔相关的菌群结构、丰度变化、生理特点、相互作用，研究湿热型与寒湿型腹泻患者的舌苔微生物菌群组成特征，探索腻苔的形成机制；进而解释舌苔菌群特征与中医证型的相关性，旨在为中医舌诊提供现代科学实验依据。

舌诊是中医独具特色的诊断方法。泄泻是临床常见疾病,湿热型和寒湿型是其常见类型，黄腻苔和白腻苔是其常见舌苔。课题组成员围绕研究目标开展各项工作。按诊断与纳入标准，完成了对寒湿型与湿热型泄泻患者及健康人群舌苔、粪便样本及舌图像及相关信息（舌苔400余例、粪便300余例，舌图400余幅）的采集与保存；建立健康人群与泄泻人群舌苔、肠道粪便样本数据库；舌象数字图像数据库。. 课题采用16S rRNA高通量测序技术，对120例泄泻患者腻苔与平人薄白苔舌面菌群差异性研究表明，黄腻苔组和正常舌苔组相比，放线菌门在两组舌苔中优势菌群占比不同并且经统计存在差异，说明放线菌门可能是导致黄腻苔形成的关键菌种；白腻苔组和正常舌苔组相比，拟杆菌门在两组舌苔中优势菌群占比不同并且经统计存在差异，说明拟杆菌门可能是导致白腻苔形成的关键菌种；黄腻苔组和白腻苔组相比，梭杆菌门在两组舌苔中优势菌群占比不同并且经统计存在差异，说明梭杆菌门可能是区别黄腻苔和白腻苔的关键菌种。随着实验与测序成本的下降，开展了泄泻病患者腻苔菌群与肠道菌群的关联性探讨；对健康人群与泄泻患者舌苔、肠道菌群72例进行特征分析；并进一步扩大了样本探究舌肠菌群变化与临床证候之间的内在联系及腻苔形成机制。 . 利用超高效液相色谱质谱（UPLC-MS）技术，开展了舌面菌群代谢产物对腻苔形成的影响探讨，运用主成分分析（PCA）、偏最小二乘法判别分析（PLS-DA）对所得数据进行多元统计分析，筛选代谢标志物，富集分析预测代谢途径。对36例样本研究表明：与正常组相比，白腻苔组与黄腻苔组的舌苔均存在着能量代谢异常，黄酮类物质代谢表达的差异可能是白腻苔与黄腻苔苔色差异的原因所在。在此基础上，进一步扩大样本开展了对泄泻舌、肠菌群代谢产物与证型及腻苔形成机制的探讨，阐释“舌为脾之外候”的生物学基础。课题已发表研究论文12篇 ，出版学术专著1部《中医舌诊与临床研究（汉英对照）》（中国中医药出版社出版）。多次参加国际国内学术会议，交流课题研究成果；培养博士研究生3人，硕士研究3人；比较顺利地完成了课题预期的研究目标。