鼠伤寒沙门氏菌嘌呤生物合成调控研究:PURbox突变分析

鼠伤寒沙门氏菌purG的顺式元件中有1个16bp的PUR box其序列为-ACGCAAACGGTTTCGT-，其中8个bp与嘌呤核苷酸从头合成途径中受purR调控的其余结构基因的PUR box相同。已证明2株O（c）突变体是其中2个bp突变的结果，本基金旨在对其余6个中的4个作突变分析。通过PCR法设计引物时分别在这4个bp引入突变，以含有完整功能的purG克隆为模板作PCR扩增，获得了含预定突变的扩增片段，这些扩增片段与调节蛋白的体外结合实验（gelretardation）证明purR调节蛋白能与野生型PUR box结合而与上述含突变的PUR box均不能结合，此结果有力证明PUR box中这4个保守碱基对维持PUR box正常功能是重要的，其中任一改变都导致PUR box功能的丧失。