电针预处理调控mitoKATP诱导脑缺血耐受的机制研究

"Pre-treatment disease" theory is the standards of TCM prevention disease, and pre-acupuncture is main means of pre-treatment disease. In preliminary experiments we found that electro-acupuncture preconditioning play a role in brain protection through reducing the content of excitatory amino acids in ischemic brain tissue. In recent years, the studies show that ATP sensitive potassium channels (KATP) play an important role in the process of pathological in various brain injury. This project will establish the model of cerebral ischemia rat and oxygen glucose deprivation model (OGD), investigating the effect of electroacupuncture preconditioning on ischemic brain tissue mitoKATP activity and the mitoKATP mediated signal pathway of the key proteins; the inhibitors of key protein will be applicated from a negative to validate, clarifying the hypothesis that "electro acupuncture preconditioning can activate mitoKATP, and promote expression of glutamate transporter mitoKATP - PKC - GLT-1 - Glutamate this pathway, reducing glutamate neurotoxicity" in vivo and vitro. This study will provide a solid theoretical basis for electro-acupuncture for ischemic stroke prevention measures.

“治未病”理论是中医防治疾病的准则，而“逆针灸”更是作为“治未病”的主要手段。预实验中我们发现，电针预处理通过降低缺血脑组织兴奋性氨基酸的含量发挥脑保护作用。近年来，研究表明ATP敏感的钾离子通道（KATP）在各种原因造成的脑损伤病理过程中发挥重要的作用。本项目拟建立脑缺血大鼠模型和氧糖剥夺模型（OGD），探讨电针预处理对缺血后脑组织mitoKATP激活及mitoKATP介导的信号通路各关键蛋白的影响;并应用各关键蛋白的抑制剂从反面验证，从体内外两方面阐明“电针预处理能激活mitoKATP，并通过mitoKATP－PKC－GLT-1－Glutamate这条信号通路促进谷氨酸转运体表达，减轻谷氨酸神经毒性”的假说，为电针作为脑缺血防治措施提供坚实的理论基础。

“治未病”理论是中医防治疾病的准则，而“逆针灸”更是作为“治未病”的主要手段。预实验中我们发现，电针预处理通过降低缺血脑组织兴奋性氨基酸的含量发挥脑保护作用。近年来，研究表明ATP敏感的钾离子通道（KATP）在各种原因造成的脑损伤病理过程中发挥重要的作用。本项目提出“电针预处理能激活mitoKATP，并通过mitoKATP－PKC－GLT-1－Glutamate这条信号通路促进谷氨酸转运体表达，减轻谷氨酸神经毒性”的假说。建立脑缺血大鼠模型和氧糖剥夺模型（OGD），探讨电针预处理对缺血后脑组织mitoKATP激活及mitoKATP介导的信号通路各关键蛋白的影响;并应用各关键蛋白的抑制剂从反面验证。证实了电针预处理能改善脑缺血再灌注后大鼠的神经功能，缩小脑梗死体积，修复了线粒体的超微结构，下调缺血半暗区TLR4、NF-κB蛋白表达，下调了mitoKATP通路Kir6.2、SUR1蛋白水平，降低了线粒体细胞凋亡程度，证实了电针预处理激活 mitoKATP 发挥脑保护作用；引入抑制剂 5-HD、抑制剂 Ro-32-0432，阻断 mitoKATP、PKC蛋白,结果表明电针预处理促进缺血区皮质pAkt、GLT-1、PKC蛋白表达，降低脑缺血后炎性损伤程度，明确了电针预处理调控 mitoKATP－PKC－GLT-1－Glutamate 通路减轻脑缺血后神经损伤，mitoKATP 是关键靶点。围绕研究内容发表国家级核心论文7篇，SCI收录文章1篇，国际会议论文1篇；获得1项实用新型专利；获得第四届高等中医药院校大学生课外学术科技作品竞赛三等奖。在项目的支持下朱路文讲师、陈慧杰讲师晋升为副教授，朱路文副教授被评为硕士研究生导师。