新型番鸭细小病毒磷脂酶A2功能域氨基酸突变对病毒毒力的影响

Novel Muscovy duck parvovirus (N-MDPV) is a newly emerging pathogenic waterfowl parvovirus, genomic characterization showed that the virus had two putative genetic recombination events with recombinant in nature between goose parvovirus (GPV) and Muscovy duck parvovirus (MDPV). N-MDPV can cause fatal diseases to Muscovy ducks, mule ducks and White Kaiva Ducks, MDPV attenuated live vaccines can not provide effective protective to the virus. Previous study verified that the parvoviruses phospholipase A2 motifs (PLA2) mutation of critical amino acids reduce PLA2 activity, proportionally and viral infectivity. In this project, based on the infectious plasmid clone of N-MDPV with genetic markers, combined with site-directed mutagenesis to obtain multiple rescue viruses (△N-MDPV). Compared the virulence with △N-MDPV and wild-type N-MDPV to Muscovy ducklings, which can be used to research the effect of PLA2 critical amino acids to N-MDPV. These data lay foundation for developing N-MDPV safe and attenuated genetic engineering vaccine with important academic significance and wide application.

新型番鸭细小病毒（N-MDPV）是我国新发水禽细小病毒，为番鸭细小病毒（MDPV）与鹅细小病毒（GPV）的基因自然重组病毒，目前仅对番鸭、半番鸭和台湾白改鸭致病，MDPV商品化弱毒活疫苗不能对其提供有效保护，给我国养鸭业造成极大经济损失。细小病毒科病毒磷脂酶A2（PLA2）功能域关键氨基酸位点突变可降低病毒侵染宿主细胞的能力，和病毒毒力密切相关。本项目以建立的具有分子遗传选择标记的N-MDPV强毒感染性克隆操作平台，利用点突变技术构建PLA2功能域氨基酸位点突变的系列拯救病毒（△N-MDPV），通过测定不同拯救毒株和强毒N-MDPV对健康雏番鸭的致病力等生物学指标，阐明PLA2功能域氨基酸突变对N-MDPV毒力的影响，为今后研发N-MDPV基因工程弱毒疫苗奠定基础，因此本项目研究具有重要的学术意义和潜在的应用前景。

新型番鸭细小病毒（N-MDPV）是我国新发水禽细小病毒，为番鸭细小病毒（MDPV）与鹅细小病毒（GPV）的基因自然重组病毒， MDPV商品化弱毒活疫苗不能对其提供有效保护，给我国养鸭业造成极大经济损失。细小病毒科病毒磷脂酶A2（PLA2）功能域关键氨基酸位点突变可降低病毒侵染宿主细胞的能力，和病毒毒力密切相关。本项目以建立的具有分子遗传选择标记的N-MDPV强毒感染性克隆操作平台（rN-MDPV），利用点突变技术构建PLA2功能域氨基酸位点突变（K75N、K69I和V79I、K75N与K69I和V79I系列氨基酸位点突变）的系列拯救病毒（p-NM100-K75N、p-NM100-K69I-V79I和p-NM100- K75N-K69I-V79I），通过测定系列拯救毒和亲本强毒对健康雏番鸭的致病力的影响。结果表明，相关位点突变拯救病毒均获得成功；雏番鸭致病性实验表明，系列拯救毒可部分减弱病毒毒力，且具有和亲本毒类似的致病特征和病理组织学结果。本研究明确了PLA2功能域氨基酸部分关键位点点突变可对N-MDPV毒力的产生影响影响，为今后研发N-MDPV基因工程弱毒疫苗奠定基础，因此本项目研究具有重要的学术意义和潜在的应用前景。