胰腺癌细胞分泌的组织蛋白酶前体诱导BMDCs致预转移小生境在胰腺癌肝转移作用中的分子机制

胰腺癌肝转移是影响胰腺癌患者预后的重要因素。以高肝转移的人胰腺癌细胞分泌的可溶性因子组织蛋白酶D（Cath-D）与宿主相互作用诱导宿主"预转移小生境"为研究对象，应用分子生物学手段和活体荧光成像系统技术，建立人胰腺癌肝预转移小生境裸小鼠动物模型，深入探讨可溶性因子Cath-D在"预转移小生境"形成中的机制，并对裸小鼠肝"预转移小生境"BMDCs表达CXC趋化因子家族和化学增活素的水平及其与招募胰腺癌细胞形成肝转移进行研究，从而阐明胰腺癌定向肝转移发生的细胞及分子机制，为通过干预宿主与肿瘤细胞的相互作用，为确定胰腺癌肝转移的预测指标和新的治疗靶点提供理论和实践基础。

胰腺癌肝转移是影响胰腺癌患者预后的重要因素。本研究从胰腺癌细胞分泌可溶性因子组织蛋白酶-D高度与宿主相互作用诱导宿主“预转移小生境”的形成的角度入手,成功建立了单克隆细胞株成为敲减组细胞系Knock down L3.6pl，KD-L3.6pl（L3.6pl-S）；及含无关shRNA的筛选出的单克隆细胞株称为阴性对照组细胞系（Negative control L3.6pl, NC-L3.6pl）。KD-L3.6pl细胞，CTSD mRNA和蛋白表达水平显著下调。细胞增殖能力减弱，迁移能力明显减弱，细胞周期发生再分布。.L3.6pl瘤荷鼠第三天骨髓和肝脏中的CD11b+细胞比例明显的多于Colo357荷瘤鼠以及假手术空白对照组.且Cathepsin D和L3.6pl培养的上清一样对于CD11b+髓系来源细胞的体外生物学行为有影响，促进CD11b+髓系细胞的增殖和迁移, 这表明在胰腺癌肝转移的过程中大量的CD11b+髓系来源细胞被招募到预转移器官肝脏中，从而参与形成预转移小生境。.用L3.6pl及Colo357条件培养液通过尾静脉分别注射方法建立了无瘤荷的胰腺癌肝预转移模型，并使用Cath-d重组蛋白作为阳性对照组。肿瘤培养液内含有肿瘤细胞释放的可溶性因子，通过在预转移时期每日定量注射可模拟肿瘤在宿主体内释放这些可溶性因子的状态, 证实了胰腺分泌的可溶性因子Cath-d与肝预转移小生境形成的有关，与宿主外周血循环中的肿瘤细胞无关。.在荷瘤小鼠中L3.6pl组的CD11b+BMDCs的数量高于L3.6pl-S和Colo357组，CXCL、S100A8和S100A9表达也高于L3.6pl-S和Colo357组，比较L3.6pl原位移植瘤模型、注射L3.6pl条件培养基的无瘤荷模型组和注射Cath-d无瘤荷模型组，三者对于BMDCs的招募，S100a8及S100a9的上调并无明显统计学差异；每一组进一步比较发现在注射1640培养基与注射CXCR和Cath-d抗体相比，在BMDCs的招募，CXCL 、S100a8及S100a9的上调明显升高，有统计学意义。表明胰腺分泌的可溶性因子Cath-d是肝预转移小生境形成的主要因素。促进人胰腺癌L3.6PL细胞定向肝转移。.