L 蛋白对塞尼卡病毒A拮抗宿主天然免疫和致病性的影响

SVA (Senecavirus A) infection caused outbreaks of vesicular disease in sows as well as neonatal pig mortality, resulting in economical loss to pig industries in China. So far, the mechanisms for SVA to cause disease and evade host immune response are poorly understood, and SVA vaccine is not currently available. Our recent study showed that a low level of IFNα was present in the sera of SVA-infected pigs and SVA L protein could antagonize IFNβ production, suggesting that SVA L protein may play critical roles for virus to suppress host innate immunity and cause pathogenicity. The SVA CH-01 virus infectious clone has been established in our lab and thereafter, we are going to rescue the L gene-deleted SVA viruses (SVA∆L). We will explore the functions of SVA L protein through analyzing the differences between SVA∆L and SVA in the interferon and antiviral cytokine production and pathogenicity. The results to be obtained will greatly help understand the functional roles of SVA L protein, SVA pathogenesis and develop attenuated vaccine.

塞尼卡病毒A (Senecavirus A, SVA)感染引起的母猪水疱病和新生仔猪死亡综合征, 给我国养猪业带来日渐严重的经济损失。做为一种新发猪病, 目前世界各国对SVA致病及免疫逃避机理的研究很少, 也无SVA疫苗可用。我们的研究发现, 猪感染SVA后血清中只产生低水平IFNα, SVA L 蛋白可拮抗IFNβ的产生, 由此推测L蛋白在SVA拮抗宿主天然免疫和致病性中起重要作用。本研究拟在已构建出SVA CH-01株病毒感染性克隆的基础上, 缺失L基因构建SVA∆L毒株, 比较SVA∆L与亲本SVA在拮抗宿主干扰素、抗病毒相关细胞因子产生和致病性等方面的差异, 确定L蛋白的功能及对病毒拮抗宿主天然免疫和致病性的影响, 为阐明SVA致病机理和研制SVA弱毒疫苗奠定基础。

由塞内卡病毒A (SVA)感染引起的母猪水疱病和新生仔猪死亡综合征属于新发的猪病毒性传染病, 然而人们对SVA的致病机理与病毒生物学知识了解不多。本研究通过构建SVA病毒感染性克隆，突变L基因，拯救病毒，从而研究多种L基因突变的SVA病毒特性。研究结果揭示了SVA L蛋白对病毒RNA产生、蛋白翻译、体外复制和病毒存活等均具有关键作用，其中L蛋白的42H、56R、79Q氨基酸缺失或突变导致病毒致死，L蛋白的5H、20G、34N、69Q氨基酸缺失或突变导致病毒致弱。为了进一步阐明L基因突变或缺失对病毒复制转录的影响，首次构建了表达荧光素酶的SVA复制子系统。通过对L基因突变和测定复制子转录表达活性的研究，揭示SVA L蛋白的5H、20G、34N、42H、69Q、56R、79Q氨基酸的突变或者缺失均严重影响了SVA的复制转录活性。通过测定不同SVA L突变毒株感染细胞的抗病毒相关细胞因子水平，揭示SVA L蛋白的5H、42H、56R氨基酸对于维持L蛋白的功能和有效病毒复制，从而激发SVA感染细胞产生抗病毒细胞因子TFN-ɑ、IL-6和STAT1等具有重要作用。最后，本研究通过研究SVA L突变毒株在猪体上的致病性，来阐述SVA L蛋白对病毒致病性的影响。结果表明，SVA 亲本毒株比SVA L突变毒株具有更强的致病性，包括临床症状、病毒血症、体温指数和血清中和抗体等。综上所述，本研究首次揭示了SVA L蛋白对于维持病毒毒力的关键作用。首次揭示SVA L蛋白的多个氨基酸不可突变或者缺失，这有助于保持SVA的有效复制转录活性和病毒的存活，从而影响病毒感染宿主细胞产生抗病毒细胞因子的强度和病毒的致病性。这些信息对于深入研究SVA的致病机理与疫病防控，具有重要的理论指导意义和参考价值。