副猪嗜血杆菌荚膜基因组织鉴定及致病机理研究

副猪嗜血杆菌是猪的一种重要的呼吸道病原细菌，至少有15个血清型，荚膜是其重要的血清分型抗原，目前荚膜的基因组织结构及致病机理尚不清楚。本项目拟根据革兰氏阴性细菌荚膜运输蛋白N端氨基酸序列高度保守的特点，参照已发表的部分革兰氏阴性细菌荚膜运输蛋白N端氨基酸和核酸序列，设计简并引物自副猪嗜血杆菌基因组中扩增相应基因片段，进而利用核酸杂交和反向PCR等技术获得荚膜基因座中所有基因片段并进行序列分析，经软件分析后绘出荚膜基因座的遗传组织结构图谱；在此基础上对荚膜运输蛋白编码基因进行缺失，构建副猪嗜血杆菌荚膜缺失突变菌株，对该突变菌株进行生物学活性特别是对猪感染性的研究，通过与野生菌株比较揭示荚膜在细菌感染过程中的致病机理。本项研究不仅可弄清副猪嗜血杆菌荚膜基因组织结构，而且可鉴定出荚膜在该菌感染过程中的致病作用和机理，对研究副猪嗜血杆菌不同血清型荚膜抗原和致病性的差异均具有重要意义。