化学合成小分子探针对Hedgehog信号转导通路特异性调控作用的研究

近些年研究发现，在一些癌症中Hedgehog信号通路过度激活，虽然Hedgehog信号通路在一些癌症中的作用机制已有所发现，但针对该通路的研究仍有许多不清楚之处。本课题就是运用化学生物学、生物信息学和组合化学的方法设计合成新的针对Hh信号通路的小分子探针，并采用固相合成方法合成化合物库。利用靶向Hh信号通路的细胞筛选体系及转基因斑马鱼筛选体系筛选有活性的化合物，进行Hedgehog信号传导通路调控机制的研究，同时找到抗肿瘤的Hedgehog通路小分子抑制剂。

本项目建立了稳定的Gli:GFP转基因斑马鱼模型，该模型可以实现整个活体胚胎快速检测Hedgehog的活性而被用作Hedgehog信号通路抑制剂的大规模筛选平台；利用建立的转基因斑马鱼筛选平台对合成的小分子探针的Hedgehog活性进行初步筛选；本项目还建立了NIH3T3-Shh-Ligh2稳定细胞系检测平台，进一步对初筛的活性化合物进行Hedgehog活性确认和量化研究；通过上述斑马鱼胚胎筛选平台和细胞检测平台获得一批具有Hedgehog信号通路抑制活性的小分子化合物探针，并利用活性小分子探针阐明Hedgehog信号通路的分子作用机制。