基于基因敲除技术的糖尿病肾病防治新靶点Gremlin的验证及其机制探讨

糖尿病肾病（DN）发病机制复杂，找到理想治疗靶点是防治DN的关键。Gremlin在糖尿病肾组织中表达异常增高，拮抗BMP7的多种肾脏保护作用，提示Gremlin可能为DN发病的关键因子之一。本实验拟建立gremlin（+/-）基因敲除小鼠模型，腹腔注射STZ诱导糖尿病，在不同时间点测定肾功能指标、蛋白尿水平；观察肾脏光镜下组织形态变化及电镜下超微结构改变；检测细胞增殖及凋亡情况及各种相关因子的表达水平，揭示抑制Gremlin表达后对肾脏的保护作用。同时，构建gremlin siRNA质粒，转染小鼠系膜细胞，并给予高糖刺激，观察细胞增生凋亡情况，检测BMP7及其下游因子磷酸化smad5的表达，同时检测糖尿病肾病相关因子TGF-beta、BMP2、PDGF、MMPs、IV型胶原和P27等的表达，进一步探讨抑制Gremlin在糖尿病肾病中的作用机制，并验证Gremlin是否为DN的理想防治靶点。