MicroRNA对格列卫耐药的慢性粒细胞白血病的多样性调控

格列卫（甲磺酸伊马替尼）是目前治疗慢性粒细胞性白血病的一线药物，多数病人在常规治疗后能使病情缓解，但是治疗过程中和治疗后仍有80%以上的患者会出现病情反复，目前多数学者认为是由于对格列卫不敏感的Bcr-Abl阳性白血病干细胞（LSCs）的存在，随着时间的的推移而出现疾病复发。目前认为microRNA在肿瘤干细胞的分化中起调节作用，是干细胞通过G1/S点所必须的，使大多数干细胞停在静止状态而对化学药物的刺激不敏感，我们从CML白血病干细胞microRNAs的表达差异为切入点，分选与白血病干细胞自我更新相关的microRNAs，寻找调控配体的途径及网络，再通过载体携带microRNA或其抑制剂转染CML白血病细胞后，抑制白血病干细胞的自我更新而阻止其增值，使干细胞停滞在静止期，或直接诱导其凋亡，减少复发，提高生存率。

本项目为了筛选得到Bcr-Abl阳性CD34 白血病干细（LSCs）和Bcr-Abl阴性CD34 白血病干细（LSCs）差异表达的microRNA，收集大量格列卫敏感及耐药的慢性髓性白血病患者的外周血及骨髓标本。经流式细胞仪分选出CD34 CD38-的白血病干细胞，提取总RNA做miRNA芯片检测。为了寻找与白血病干细胞自我更新相关的microRNA，本项目体外培养慢性髓性白血病细胞株k562及对格列卫耐药的k562G，流式细胞仪分选白血病干细胞，提取总RNA做miRNA检测。我们已经筛选到k562及k562G两株细胞的miRNA的表达差异，通过芯片结果以及标本的验证分析，我们选择miRNA-224、miRNA-345、miRNA-452、miRNA-193b、miRNA-320a进行下一步的功能学实验研究，争取为克服CML格列卫耐药寻找新的方法，减少格列卫治疗后复发提供有益探索。