SiRNA介导的Gremlin1表达抑制对肝纤维化形成的影响

肝损伤-炎症-修复过程激活TGF-β信号，进而活化肝星状细胞，使胶原蛋白合成和细胞外基质沉积增加是肝纤维化（HF）形成的关键。研究发现TGF-β信号可被BMP有效抑制；Gremlin1是BMP拮抗剂家族成员之一，与胚胎发育密切相关、成年后表达沉默，但在纤维化病变时表达增多。我们的前期研究发现，HF病人血清和HF大鼠模型肝组织中Gremlin1均明显增多，培养细胞中高表达Gremlin1可使胶原蛋白、α-SMA表达明显增加。提示沉默的Gremlin1基因重新表达后，通过拮抗BMP对TGF-β的负调控而加强炎症及纤维化信号可能是HF进程中的重要环节。阻断Gremlin1基因表达的重新活化可能成为HF防治的有效途径。本研究旨在通过RNA干扰技术建立抑制Gremlin1表达的细胞和动物模型，并观察其表达抑制对HF形成的影响。本项目的成功实施，有助于阐明HF发生的分子机制，为HF的分子治疗奠定基础。

摘要：肝损伤-炎症-修复过程激活TGF-β信号，进而活化肝星状细胞，使胶原蛋白合成和细胞外基质沉积增加是肝纤维化（HF）形成的关键。研究发现TGF-β信号可被BMP有效抑制；Gremlin1是BMP拮抗剂家族成员之一，与胚胎发育密切相关、成年后表达下调，但在纤维化病变时表达增多。我们的研究发现，培养HSC-T6细胞中高表达Gremlin1可使Ⅰ型胶原蛋白、α-SMA等表达明显增加。提示沉默的Gremlin1基因重新表达后，通过拮抗BMP对TGF-β的负调控而加强炎症及纤维化信号可能是HF进程中的重要环节。阻断Gremlin1基因表达的重新活化可能成为HF防治的有效途径。本研究旨在通过RNA干扰技术建立抑制Gremlin1表达的细胞和动物模型，并观察其表达抑制HSC活化、对HF形成的影响。研究发现在HSC-T6细胞中抑制Gremlin1表达，可激活BMP信号通路，拮抗TGF-β信号通路，从而使其Ⅰ型胶原蛋白和α-SMA表达降低，HSC-T6的活化受到抑制。体内研究也表明，通过siRNA抑制CCL4诱导的HF模型的SD大鼠中gremlin1表达，可有效逆转其HF进程。我们还对慢性肝病病人血清、肝组织gremlin1的表达水平进行了初步分析，发现慢性肝炎病人血清和肝脏组织中gremlin1表达即有上升，随着病程进展，肝硬化病人血清、肝组织中gremlin1表达水平最高。因此我们认为，抑制Gremlin1表达可能起到逆转肝纤维化的作用，Gremlin1有可能作为抗肝纤维化的新的分子靶点，并可能为肝纤维化的诊断、疗效评价提供新的指标。