乏氧条件下树突状细胞介导的Th1/Th2失衡在重度子痫前期发病中的研究

子痫前期是妊娠期特发、常见的并发症，重度子痫前期常伴发较高的母儿病率及死亡率。其发病机制不明确，免疫机制可能发挥重要作用。树突状细胞（DC）作为最强大的抗原提呈细胞，能够活化T细胞参与免疫耐受和免疫排斥。本课题对外周血和子宫蜕膜组织中DC进行分离和培养，利用流式细胞技术检测表型变化，同时对外周血和子宫蜕膜组织中Th1、Th2型细胞因子进行检测，并与子痫前期病情程度进行相关性分析。在常氧和乏氧条件下对外周血来源地DC进行诱导培养，成熟后采用流式细胞技术和RT-PCR技术检测其表面趋化因子CCR5的表达，采用RT-PCR和western-blot方法检测MMP-9的表达，并通过侵袭小室试验检测其迁移能力，以此来评价子痫前期患者DC细胞的功能，通过研究子痫前期与正常孕妇DC在常氧和乏氧条件下功能的差异，以期阐明乏氧条件下DC在重度子痫前期发病中的所起的作用。

子痫前期是妊娠期特发、常见的并发症，重度子痫前期常伴发较高的母儿病率及死亡率，其病因和发病机制尚不明确。免疫机制可能发挥重要的作用，树突状细胞（DC）作为最强大的抗原提呈细胞，能够活化T细胞参与免疫耐受和免疫排斥。本课题研究中我们首次采用流式细胞术检测子痫前期患者与正常妊娠者、正常未孕者外周血中Th17、Treg细胞的数量及百分比，采用酶联免疫吸附试验( ELISA )法检测子痫前期患者与正常妊娠者、正常未孕者血浆中IL-17、IL-10以及TGF-β1的浓度。结果显示：妊娠期Treg细胞在建立和维持母~胎之间的双向免疫平衡中发挥了重要作用，正常妊娠的维持有赖于Treg细胞介导的免疫耐受状态，子痫前期患者外周血中Th17/Treg之间的平衡失调而倾向于Th17介导的促炎状态，这一机制可能参与子痫前期的发生发展；采用RT-PCR法检测MRP1、MRP4mRNA在正常妊娠孕妇不同孕期和在重度子痫前期患者晚孕期母胎界面的表达水平，用ELISA法测定LTB4在健康未孕妇女、正常妊娠孕妇和重度子痫前期患者血清中的浓度，结果表明：MRP1和MRP4可能参与介导了母胎界面DCs迁移和分化并影响了局部的免疫反应取向-免疫应答或是免疫耐受，这为研究子痫前期的发病机制提供了一条新思路，而MRP1和MRP4将有可能成为子痫前期免疫治疗的新靶点，血清LTB4的表达变化可能在正常妊娠的成功和维持中发挥重要作用；利用ELISA法分别检测正常妊娠早、中、晚期及子痫前期晚期妊娠血清chemerin表达水平，用免疫组织化学SP法及RT-PCR 技术检测不同孕周正常妊娠胎盘组织中chemerin水平,结果提示：低水平chemerin介导的免疫耐受状态可能与正常妊娠早期、中期的发生和发展相关，高水平chemerin介导的局部免疫炎症应答反应则可能与发动临产相关；子痫前期患者外周血清中高水平的chemerin表达可能参与子痫前期的发生和发展。以上研究结果进一步揭示了DC介导的免疫耐受和免疫排斥与子痫前期发生、发展的相关关系，为探讨子痫前期的发病机制、预防及治疗提供了新思路，具有重要的意义。