针对人的α1-抗胰蛋白酶突变体α1-AT Pitts具有高度抑制凝血酶活性,对抗凝血酶Ⅲ缺乏症具有潜在的治疗意义的特点,我们采用基因工程技术,仅由一对PCR引物一步实现了α1-抗胰蛋白酶α1-AT cDNA定点诱变和扩增。经过一系列重组,得到正确的突变基因α1-AT Pitts。将其克隆入含α-因子信号肽的诱导分泌型表达载体pMB414,并经过相应的修饰,在酵母细胞中表达培养,得以了分泌到胞外具有抗凝血酶活性的α1-AT Pitts表达产物。另外,还在大肠杆菌中克隆和表达了α1-AT Pitts和α1-AT,得到了具有抗原活性一定生物活性的表达产物。两种表达系统的表达产物有助于研究糖基化与否对生物活性及理化性质等的影响。为血栓栓寒性疾病的防治研究展示了应用前景。
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数据更新时间:2023-05-31
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