死亡受体DR6在肿瘤发生发展中的功能和作用机制

Death receptor family is not only play a role by inducing apoptosis of tumor cells, and possibly play an important role in tumorgenesis and developmentby other mechanisms. Some family members are promising targets for cancer treatment. The death receptor DR6 is highly expressed in cancer cell lines and tumor tissue. But the function of DR6 in cancer incidence and development has not been reported. Our preliminary study showed that inhibition of DR6 expression in mouse cancer cells reduces cancer incidence as well as the size of the tumours. And also the inhibition of tumor angiogenesis, decreasing significantly, tumour-infiltrating CD3+ T cell ratio. Based on these results, we will aims at the function of DR6 in cancer in this study. With DR6-/- cancer cells and DR6-/- mice, the function and regulation mechanism of DR6 in cancer initiation, progression and metastasis will be clarified. The dynamic changes of cytokines, chemotactic factor, immune cells in tumor progression induced by DR6 will be analyzed. And we will try to find the natural ligand of DR6 from over-expression system and tumor tissue extract, reveal the signal transduction pathway. DR6 agonist or antagonist antibodies will be established for cancer diagnosis or treatment after clarified the function of DR6 in tumor.The study will lay the foundation for the new target for tumor treatment and prevention.

死亡受体家族的成员不仅仅是通过诱导肿瘤细胞凋亡起作用，还有可能通过其他功能在肿瘤发生发展中发挥作用，某些家族成员是目前肿瘤治疗领域非常有前景的靶点。死亡受体DR6在很多肿瘤细胞和肿瘤组织中高表达，但其在肿瘤发生发展中的功能还未见报道。我们的前期研究发现DR6表达受抑制后，小鼠皮下肿瘤生长受到抑制，肿瘤组织血管形成显著减少，肿瘤侵润的CD3＋ T细胞比例显著降低。本研究拟在此基础上，围绕DR6展开研究，利用DR6-/-肿瘤细胞和DR6-/-小鼠深入研究其对肿瘤发生、发展、转移的影响，动态分析肿瘤进展过程中DR6引起的细胞因子、趋化因子、免疫细胞的变化规律，并利用过表达体系和肿瘤组织提取物去寻找DR6的天然配体或结合蛋白，揭示新的信号转导机制；明确DR6在肿瘤中的功能后，尝试建立DR6的激动型或拮抗型抗体以对肿瘤进行诊断或治疗。该研究将可为寻找肿瘤治疗和预防的新靶点奠定基础。

肿瘤坏死因子（TNF）的家族成员及其受体在肿瘤细胞生长、细胞凋亡和分化中具有重要的功能。死亡受体6（DR6）是TNF受体超家族、死亡受体亚家族成员之一。到目前为止，DR6的大多数研究都集中在其对免疫系统和中枢神经系统的影响。本课题围绕DR6展开研究，深入研究其对肿瘤发生、发展、转移的影响，分析肿瘤进展过程中DR6引起的细胞因子、趋化因子、免疫细胞的变化规律，发现DR6可调控NF-κB、P38 MAPK和STAT3等炎症相关信号分子的磷酸化，从而调节IL-6、VEGF和PDGF的表达，并对肿瘤细胞血管形成产生重要影响。. 通过分析TCGA数据库，发现DR6在卵巢癌中表达升高。我们收集卵巢癌临床样本发现DR6在卵巢癌临床样本中表达上调。抑制DR6表达后细胞增殖没有明显变化，但是细胞迁移能力受抑制。利用IP结合质谱技术寻找到DR6的结合蛋白KIF11，并证明DR6的促肿瘤迁移功能是通过KIF11实现的。.此外，利用小鼠杂交瘤技术筛选到一株特异性和亲和力都较高的DR6单克隆抗体，但对肿瘤血管形成和肿瘤细胞迁移的作用并不强。而根据其在卵巢癌组织中表达升高较为显著的结果，目前正在尝试是否可以基于该抗体发展为卵巢癌特异的检测试剂。另外由于DR6在神经系统疾病尤其是阿兹海默症的作用已有很多文献报道，功能较明确，后续研究中拟检测DR6的抗体在阿兹海默症模型中的作用。. 我们收集了大量的临床样本进行检测，发现DR6在肿瘤病人中的表达差异并没有死亡受体其他家族成员那么明显。仅在卵巢癌病人中较为显著，而在卵巢癌中针对DR6功能的研究中发现，和其他死亡受体相比，DR6对肿瘤细胞的表型调控作用没有其他死亡受体强。通过比较结果及文献跟踪发现，在死亡受体家族成员中，DR5是功能最明确的一个肿瘤治疗靶点，DR5作为肿瘤治疗靶点的适用性明显强于DR6。因此我们进一步开展了以死亡受体家族成员DR5为靶点的肿瘤治疗研究。构建了miR-221-Zip分子，发现该分子可逆转肺癌细胞对DR5靶点的基因治疗药物AAV-TRAIL的耐药性，而且外周血中的miR-221可能成为耐药性检测标志物。