Th1/Th2细胞失衡模式在分泌性中耳炎发病机制中作用的研究

分泌性中耳炎（secretory otitis media with, SOM）的发病机制至今尚未完全阐明。目前研究认为免疫反应在OME的发生发展中起重要作用，但对免疫反应的具体作用方式和调控机制并不清楚。本研究结合细胞、蛋白和基因三个水平，探讨SOM病因机制中CD4+ T 细胞的作用，通过流式细胞技术、酶联免疫吸附实验（ELISA）和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）等方法，分别检测OME患者外周血及中耳积液中CD4+T 细胞亚群的数量变化、各具体细胞因子的含量差异及调控细胞分化的相关转录因子表达水平，整体研究免疫机制在SOM病因学中的作用。同时初步探索CD4+CD25+T细胞作为免疫调节机制的关键环节是否参与SOM的发生发展。本项目的开展将有助于进一步揭示SOM的免疫学发病机制，有望为SOM的基础研究和临床治疗提供新方法和新策略。

分泌性中耳炎（secretory otitis media, SOM）的发病机制至今尚未完全阐明。目前研究认为免疫反应在SOM的发生发展中起重要作用，但对免疫反应的具体作用方式和调控机制并不清楚。. 经过3年的实验研究，我们对140例来我院治疗的SOM患者进行了外周血和中耳积液的采集，同时对正常对照组的55例患者进行了外周血的采集。针对采集的样本我们进行了严格筛选，对其中30例实验组和20例正常对照组的血液，通过流式微球分析(Cytometric Bead Array，CBA法)分别检测Th2 型细胞因子白介素4( interleukin-4，IL-4) 、白介素5（interleukin-5，IL-5）、白介素6（interleukin-6，IL-6），Th1型细胞因子干扰素γ( interferon-γ，IFN-γ) 、白介素2（interleukin-2，IL-2)，Th17型细胞因子白介素17（interleukin-17，IL-17)。同时通过流式细胞技术（flow cytometry，FCM）检测Th2型细胞因子白介素4( interleukin-4，IL-4) 和Th1型细胞因子干扰素γ(interferon-γ，IFN-γ)，对比病例组及正常对照组外周血，病例组外周血及中耳积液之间IL-4和IFN-γ含量以及两者比例变化。我们还对26例患者（4例拒绝）进行了皮肤点刺实验，其中阳性6例，阳性率23.08%。实验结果显示：Th2活化亢进，Th2/Th1平衡失衡，可能是分泌性中耳炎发病的重要基础；过敏反应主要在全身起作用，中耳局部的免疫反应有待进一步进行探索；Th17活化亢进在分泌性中耳炎发生发展过程中也可能起一定作用，是分泌性中耳炎发病机制之一；分泌性中耳炎皮肤点刺试验阳性率与哮喘及变应性鼻炎相比较较低，不足以作为筛选工具。我们还对20例正常对照组合75例实验组通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）的方法进行了转录因子水平的检测，检测了血液及中耳积液中T-bet、GATA-3、FOXP3的表达。. 检测SOM患者外周血及中耳积液中CD4+T 细胞亚群的数量变化、各具体细胞因子的含量差异及调控细胞分化的相关转录因子表达水平，整体研究免疫机制在SOM病因学中的作用。同时初步探索CD4+CD25+T细胞作为免疫调节机制的关键环节是否参与SOM的发生发