柯萨奇病毒蛋白VP1和细胞蛋白GM130相互作用的研究

申请人的前期工作表明，以CVB3病毒VP1为诱饵、运用酵母双杂交系统从人心脏cDNA文库中筛出了多个阳性克隆，再经三种排除假阳性的试验证实，只有四个阳性蛋白与VP1存在相互作用。其中，GM130是这四个阳性蛋白之一。本研究在此工作基础上，进一步运用激光共聚焦定位分析技术探讨VP1和GM130在细胞内的共定位；利用基因缺失突变法、酵母双杂交系统、体外免疫共沉淀和放射自显影技术确定VP1和GM130相互作用的各自必需区域；分别在细胞和动物水平上探讨VP1和GM130相互作用对GRASP65稳定性的影响；进而，探讨VP1和GM130相互作用对Golgi ribbon结构的影响以及对细胞分裂的影响机制，从而初步阐明两种蛋白的相互作用在CVB3病毒致宿主细胞病变中的分子致病机制。