脂肪酸去饱和酶（SCD1）基因及调控其基因网络对牦牛乳中不饱和脂肪酸调节机理

Yak from indigenous growth in Qinghai Plateau , we will analyze unsaturated fatty acids (UFA) content distribution in yak milk from different lactation by the GC/MS,meanwhile dedicated to study on desaturase enzyme gene,Leptin,PPAR,SREBP of relative expression levels in different lactation by the real-time quantitative PCR.We foucs on the relationship between yak lactation ,the gene express , fatty acids desaturase with the profile of unsaturated fatty acids .We analyze the gene network of Leptin ,PPAR,SREBP in order to building the mechnism of regulatory UFA secretion .Grasping the regulation mechanism of UFA is conducive to further provide theory of promote secrete content of UFA , to improve the nutritional quality of yak milk.

选择青海高原土著生长的牦牛为研究对象，利用GC/MS分析不同泌乳期的牦牛乳中不饱和脂肪酸（UFA）含量分布，同时利用实时荧光定量PCR技术检测脂肪酸去饱和酶（SCD1）在不同泌乳期相对表达量，并分析瘦素Leptin、甾醇类调控元件结合蛋白SREBP、过氧化物酶体增殖物激活受体( PPARs)形成的调控基因网络对不饱和脂肪酸的调节，探索基因网络对不饱和脂肪酸的调控机理，为进一步提高牦牛乳中UFA含量，改善牦牛乳的营养品质提供理论依据。

对牦牛去饱和脂肪酶1（SCD1）基因测序,并对牦牛不同组织中SCD1基因表达差异分析。采用气相色谱法，对不同泌乳期的牦牛乳进行脂肪酸含量的测定，获得MUFA、PUFA、SFA、UFA及BCFA的相对含量分布。. 对不同泌乳期牦牛乳脂肪酸去饱和酶（FADS）、硬脂酰辅酶A去饱和酶（SCD1）、甾醇类调控元件结合蛋白（SREBP）、过氧化物酶体增殖物激活受体( PPARs) 、脂肪酸延长酶（ELOVL）基因表达差异进行分析。. 研究了不同泌乳期牦牛乳外泌体中各基因的差异表达，在整个泌乳过程中，与乳脂肪合成有关的8个基因分别为SCD1、FASN、FADS1、FADS2、ELOVL1、ELOVL6、PPARG和SREBP1，相对表达量在大体上均呈现先上升后下降的趋势，均在泌乳中期时达到各基因的表达高峰，与泌乳初期的表达量相比显著上升（P＜0.05），分别上调13.6、1.4、4.7、20、14.8、3.9、1.7和25倍，其中SCD1、ELOVL6、SREBP1基因上调倍数较高，证明其在乳脂合成过程中的重要作用。.通过对泌乳初期和泌乳盛期牦牛乳外泌体miRNAs进行高通量测序，丰富了牦牛乳外泌体基础数据。. 筛选出Fst_exs和Mid_exs样品的特异性表达miRNAs，这些miRNAs大多与免疫调节相关，说明miRNAs在不同的泌乳期发挥着不同的免疫调节作用。.与免疫相关的miR-148a、miR-30a、let-7a、let-7f在不同物种（人、袋鼠、熊猫、牦牛、牛、猪）乳exosomes中表达均较高，推测这些免疫相关miRNAs会被新生儿消化吸收，进而在免疫系统的发育过程中发挥重要作用。Fst_exs和Mid_exs样品中表达差异最显著的miRNAs，均与脂肪细胞的分化及免疫调节过程有关。参与脂肪细胞分化的miRNAs在Mid_exs样品中均显著上调，说明随泌乳的进行，miRNAs在乳脂肪形成过程中的重要调控作用。KEGG富集得出核糖体通路（Ribosome）为显著富集项，富集到94个候选靶基因，为差异miRNAs的靶基因分析提供数据支持。