人泡沫病毒Tas蛋白与细胞Pirh2蛋白的相互作用及功能研究

人泡沫病毒（HFV）属逆转录病毒科，其独特的感染机制和不明显的致病作用使得HFV作为安全的基因转移载体而日益受到人们的重视。Tas是HFV的反式激活因子，在病毒感染和复制中具有重要功能，但是其调控机制目前尚不十分清楚。我们前期工作通过酵母双杂交筛选出HFV Tas的互作蛋白- - Pirh2蛋白，且GST-Pull down实验初步证实了它们的相互作用。本研究将利用免疫共沉淀、荧光共定位、序列突变分析等方法进一步确证它们的相互作用及结合位点，然后通过RNA干扰、EMSA和Western blotting等技术探索Tas与Pirh2相互作用对HFV病毒感染和复制等功能的影响。本项目的完成将为阐明Tas蛋白新的调控功能，以及揭示HFV感染分子机制和载体安全性等都具有重要的意义，也将为探讨其它逆转录病毒的感染分子机制与抗病毒治疗提供有益的线索。

人泡沫病毒（HFV）属逆转录病毒科，其独特的感染机制和不明显的致病作用使得HFV作为安全的基因转移载体而日益受到人们的重视。Tas (Trans-activator of spumavirus) 是HFV的反式激活因子，在病毒感染和复制中具有重要功能，但是其调控机制目前尚不十分清楚。我们前期工作通过酵母双杂交筛选出HFV Tas的互作蛋白——Pirh2（P53-induced RING-H2 protein）蛋白，且GST-Pull down实验初步证实了它们的相互作用。本研究我们利用免疫共沉淀、荧光共定位、序列突变分析等方法进一步确证了它们的相互作用及结合位点，然后通过RNA干扰和Western blotting等技术探索了Tas与Pirh2相互作用对HFV病毒感染和复制等功能的影响，结果表明Pirh2抑制HFV Tas介导的LTR的转录活性且与Pirh2 的RING 结构域相关；进一步，Pirh2可以明显地抑制HFV结构基因的mRNA和蛋白水平。我们的结果对阐明Tas蛋白新的调控功能，以及揭示HFV感染分子机制和载体安全性等都具有重要的意义，也将为探讨其它逆转录病毒的感染分子机制与抗病毒治疗提供有益的线索。