白介素21对EBV阳性弥漫性大B细胞淋巴瘤生长调控的药理作用及机制

Diffuse large B cell lymphoma (DLBCL) is the most encountered malignant lymphoma. Based on EBV carrying status, DLBCL can be subgrouped into EBV positive and EBV negative. EBV positive DLBCL is frequently found in patients older than 50 and the clinical features are significantly different from EBV negative DLBCL. Previous study showed that IL-21 could induce apoptosis of DLBCL cells. However this study did not check the EBV carrying status of the DLBCL cells. Therefore they did not compare the difference between EBV positive cells and their EBV negative counterparts after IL-21 treatment. In our previous study, we have screened out and characterized an EBV positive DLBCL cell line and then investigated the effect of IL-21 on this line. Surprisingly, IL-21 treatment promoted proliferation of this line. EBV knockout experiment showed that EBV plays an essential role in the IL-21 induced proliferation of this cell line. Based on our preliminary founding from this cell line study, we plan to further investigate the effect of IL-21 on EBV positive DLBCL cell lines, primary tumor cells and in vivo tumor models and to study the mechanism behind them. This study will provide evidence and guide the future application of IL-21 treatment on DLBCL.

弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）是临床上最常见的恶性淋巴瘤，基于是否携带EBV，其可被定义为EBV阳性或EBV阴性。EBV阳性DLBCL通常发生在年逾50的老年群体中，其临床特征与EBV阴性DLBCL显著不同。此前研究显示IL-21可引起DLBCL细胞凋亡，然而该研究并没有关注所用肿瘤以及肿瘤细胞系是否携带EBV，因而也没有对比EBV阳性细胞与EBV阴性细胞对IL-21敏感性的差异。我们在前期研究中筛选并鉴定了一株EBV阳性DLBCL细胞系，且通过研究发现IL-21可诱导该细胞株细胞增殖。病毒敲除实验证实了EBV在IL-21诱导该细胞株增殖的过程中起核心作用。本课题拟在前期单一细胞系研究的基础上，系统的研究IL-21对EBV阳性DLBCL细胞系、原代肿瘤细胞以及体内环境下肿瘤的药理作用及机制，以便为今后临床上安全有效的使用IL-21治疗DLBCL以及药物受众群体的合理选择提供理论依据。

在前期研究的基础上，本研究通过细胞增殖实验检测了不同EBV阳性DLBCL细胞系和原代淋巴瘤细胞对IL-21的敏感性，并通过EBV阳性DLBCL荷瘤NOD/SCID小鼠模型验证了IL-21对EBV阳性DLBCL体内肿瘤的促生长效果。考虑到IL-21在今后将用于临床治疗包括EBV阳性DLBCL在内的多种淋巴瘤，这一发现为今后IL-21在临床上用于治疗EBV阳性弥漫性大B细胞淋巴瘤的药物安全性评价及受众群体的选择提供了直接而有力的理论指导。 .基于华大基因BEISEQ-500转录组测序平台检测分析，我们发现了IL-21处理后EBV阳性DLBCL细胞系Farage与原代样本在淋巴瘤研究相关基因变化模式上具有显著相关性，并鉴定了IL-21所影响的关键信号通路。这一研究成果从机理上阐明了IL-21诱导EBV阳性DLBCL细胞增殖的分子机制，为今后深入研究IL-21诱导的EBV阳性DLBCL耐药机制和相关靶向药物的研发奠定了坚实的理论基础。. 我们发现IL-21可促进EBV阳性DLBCL对CHOP（临床上常见的淋巴瘤化疗药物组合）治疗的耐药性，进一步揭示了IL-21在EBV阳性DLBCL临床治疗中的潜在问题和隐患。. 通过dn-EBNA1体系敲除了EBV阳性DLBCL细胞系Farage中的EBV，本研究证实了EBV对EBV阳性DLBCL细胞的存活具有重要的意义。.利用AGS-GFP-AKATA-EBV工程细胞系成功生产了GFP标记的EBV，建立了GFP-EBV感染的EBV阳性及阴性DLBCL细胞系，为后续研究奠定了基础。.通过药物筛选发现咖啡酸苯乙酯（CAPE）对EBV阳性DLBCL具有显著的生长抑制作用，并发现CAPE可显著提升CHOP（临床上常见的淋巴瘤化疗药物）对EBV阳性DLBCL的治疗效果。通过EBV阳性DLBCL荷瘤NOD-SCID小鼠模型验证了CAPE的体内抗EBV阳性DLBCL的药效，为今后研发抗EBV阳性DLBCL新药提供了有潜力的先导化合物。. 综上所述，本研究的各项研究成果不仅为今后IL-21在临床上用于治疗EBV阳性弥漫性大B细胞淋巴瘤的药物安全性评价及受众群体的选择提供了直接而有力的理论指导，而且为今后研发临床上可用于治疗EBV阳性弥漫性大B细胞淋巴瘤的新药提供了理论依据和实践基础。