猪流行性腹泻病毒传统与流行毒株感染差异机制研究

Recently, endemic prevalence of porcine epidemic diarrhea virus has become extensive outbreak in China. Classic vaccines based on PEDV CV777 strain could provide partial protection only. These data imply that the currently prevalent PEDV has changed its characterizations in genome and infection tropism etc. Nonetheless, no related mechanisms are revealed. In this study, we will utilize PEDV strain CV777 and recently isolated stain HLJBY as experimental materials to perform below assays: characterize their tropism and distribution in pig tissue and susceptible cells by immunohistochemical and pathological techniques; perform comparative genome analysis to investigate discrepant genetics basis of PEDV; perform proteomics analysis of PEDV-infected cells to identify infection-related molecules. By above-mentioned experiments, molecular mechanisms regarding the recombination, infection tropism and discrepant proteins elicited by PEDV can be clarified.

近年来，猪流行性腹泻病毒（PEDV）在我国发病情况由地方流行性转为广泛爆发，传统疫苗株对免疫猪仅能提供部分保护，提示新流行的PEDV在基因组和感染特性方面已经出现了明显的改变。但此变化出现的机制尚未清楚。本课题拟用PEDV 经典毒株CV777和近期分离的地方流行毒株HLJBY 株为实验材料，通过免疫组织化学和分子病理学方法分析它们对猪组织和敏感细胞亲嗜性及其表达分布特征；开展这两种毒株的比较基因组研究，分析不同毒力PEDV致病性差异的遗传基础；进行病毒感染后宿主细胞蛋白质组学分析，鉴定PEDV感染宿主细胞的相关分子。通过上述的PEDV传统毒株和流行毒株基因水平、感染组织分布及感染后引起宿主蛋白组学变化差异研究有助于阐明新近流行PEDV的重组突变和病毒致病力差异的分子机制。

近年来，猪流行性腹泻病毒（PEDV）在我国发病情况由地方流行性转为广泛爆发，传统疫苗株对免疫猪仅能提供部分保护，提示新流行的PEDV 在基因组和感染特性方面已经出现了明显的改变。但此变化出现的机制尚未清楚。本课题利用细胞培养技术分离鉴定了PEDV HLJ株，感染易感猪可引起典型的临床症状和病理变化，在空肠和回肠引起明显的病理变化，且其病理损伤与病毒分布息息相关；而感染PEDV CV777毒株则病理变化轻微。全基因组测序及其分析表明PEDV HLJ株属于流行毒株，与国内2014-2015年流行毒株遗传关系紧密。蛋白组分析表明PEDV CV777感染IPEC-J2细胞蛋白与对照组比较有70个上调蛋白和139个下调蛋白，其中较为明显的有5个上调蛋白和8个下调蛋白。而PEDV HLJ株感染细胞蛋白与CV777比较差异明显的有6个上调蛋白和5个下调蛋白。基因组检测也得到了类似的结果，和蛋白组变化比较变化趋势相同的有3个蛋白质，可依此鉴定PEDV 感染宿主细胞的相关分子。通过上述的PEDV 传统毒株和流行毒株基因水平、感染组织分布及感染后引起宿主蛋白组学变化差异研究有助于阐明新近流行PEDV 的重组突变和病毒致病力差异的分子机制。