PD1在真菌性角膜炎中对免疫细胞及分子调控作用的研究

Fungal keratitis (FK) is a severe blindness causing disease. Fungi and inflammation contributes to the disease. Anti-fungal treatment cannot solve the problem of excessive inflammation. Apoptosis of neutrophils and the following phagocytosis could regulate the excessive inflammation. Protectin D1 (PDl), as a lipid mediator, participate in the regulation of immune response. This research intends to analyze the regulation role of PD1 on immune cells and molecules and signaling pathway in FK. First, we will detect the effect of PD1 on neutrophil recruitment and apoptosis, and then analyze the effect of PD1 on phagocytosis of the apoptotic neutrophils and pathogen and the differentiation of M2c macrophages. At last, the treatment role of PD1 combined with anti-fungal medicine in fungal keratitis will be detected. Reveal the role of PD1 and provide new idea for the treatment of FK.

真菌性角膜炎是严重的致盲性眼病。真菌菌丝及机体炎症反应共同参与真菌性角膜炎发病机制。抗真菌药物不能解决炎症反应导致角膜基质破坏的问题。中性粒细胞的凋亡及巨噬细胞吞噬作用参与控制炎症反应，减轻局部组织破坏。保护素D1（Protectin D1, PDl）作为脂质调控介质发挥炎症调控作用。本项目拟研究PD1在真菌性角膜炎中PD1对中性粒细胞募集和凋亡、巨噬细胞分化和吞噬作用的调控及通路，研究PD1联合抗真菌药物治疗真菌性角膜炎的可行性。首先明确PD1对角膜中性粒细胞募集和凋亡的影响，并进一步研究其对中性粒细胞发挥调控作用的信号通路；在此基础上分析PD1对巨噬细胞吞噬中性粒细胞和病原体，以及对角膜中M2c巨噬细胞分化的影响，最后分析PD1联合抗真菌药物伏立康唑对真菌性角膜炎的治疗作用。揭示真菌性角膜炎发病过程中PD1的作用，有望为真菌性角膜炎的抗真菌治疗联合抗炎治疗提供理论基础和新的思路。

1.项目背景：真菌性角膜炎是严重的致盲性眼病。真菌的致病力及感染后诱发的炎症反应共同参与真菌性角膜炎发病机制。目前抗真菌药物不能解决过度炎症反应导致角膜基质破坏的问题。保护素D1（Protectin D1, PD1）作为脂质调控介质发挥炎症调控作用。截止本项目开始前，PD1在真菌性角膜炎中的作用尚未阐明。.2.主要研究内容：①检测PD1对真菌性角膜炎角膜病变程度、炎症反应以及真菌重要模式识别受体的影响。②检测PD1对真菌性角膜炎角膜浸润中性粒细胞数以及凋亡的影响。③体内实验分析PD1对真菌感染角膜中巨噬细胞数目的影响，检测PD1对角膜中M2巨噬细胞分化的影响。④检测PD1对角膜神经再生及角膜感觉恢复的影响，检测PD1对神经肽VIP、CGRP的影响。.3.重要结果：①PD1通过抑制感染部位的IL-1β、TNF-α、MIP-2等促炎性因子和模式识别受体LOX-1的表达，在角膜局部抑制炎症反应，减少角膜组织炎症性损伤。②PD1抑制角膜中性粒细胞的募集，促进坏死中性粒细胞的凋亡，从而抑制过度的炎症反应。③PD1促进角膜中巨噬细胞的M2c极化，促进巨噬细胞的吞噬作用，促进角膜组织的修复。④PD1促进角膜真菌感染后破坏角膜神经的再生，恢复角膜的知觉和敏感性，并通过增加CGRP、VIP等神经肽的释放，促进角膜在角膜炎后的修复。.4.科学意义：揭示真菌性角膜炎发病过程中PD1的作用，丰富了真菌性角膜炎致病机理的知识框架，有望为真菌性角膜炎的抗炎及神经修复治疗提供理论基础和新的思路。