小儿血管瘤演变中PI3K/AKT/mTOR信号通路的作用及调控

血管瘤是小儿最常见的肿瘤，研究提示：血管瘤由增生向退化转变的原因可能是细胞间信号传递的改变。PI3K/AKT/mTOR信号通路活化可以抑制细胞凋亡,促进细胞增殖,并参与血管形成。我们发现，mTOR蛋白在小儿血管瘤增殖期表达高于消退期，其下游活化的p70S6K-α表达则消退期高于增殖期。本课题将利用临床病理标本、血管瘤动物模型和体外培养的人血管瘤内皮细胞，运用免疫组化/免疫荧光、流式细胞分析、三维彩超检查、定量PCR及western blotting等技术，分析PI3K/AKT/mTOR信号通路关键信号分子在血管瘤演变中的变化规律，并用药物与细胞因子进行正性/负性调控。一方面分析该信号通路对血管瘤内皮细胞增殖动力学的影响，另一方面阐明干预调控对血管瘤增生、消退的影响，从而揭示PI3K／AKT／mTOR信号通路在小儿血管瘤演变中的作用。

血管瘤是小儿最常见的肿瘤，研究提示：血管瘤由增生向退化转变的原因可能是细胞间信号传递的改变。PI3K/AKT/mTOR信号通路活化可以抑制细胞凋亡,促进细胞增殖,并参与血管形成。我们发现，mTOR蛋白在小儿血管瘤增殖期表达高于消退期，其下游活化的p70S6K-α表达则消退期高于增殖期。本课题利用临床病理标本、血管瘤动物模型和体外培养的人血管瘤内皮细胞，运用免疫组化、流式细胞分析、定量PCR及western blotting等技术，分析PI3K/AKT/mTOR信号通路关键信号分子在血管瘤演变中的变化规律，并用药物与细胞因子进行正性/负性调控。结果显示：1.增殖期血管瘤中PI3K、p-Akt蛋白和mRNA表达率和表达强度均明显高于消退期血管瘤，PI3K与p-Akt的表达呈正相关。2.体外培养血管瘤内皮细胞中有p110、p-Akt及Akt表达。p110，p-Akt蛋白的表达水平低时，G0/G1期细胞比例和细胞总凋亡率高，反之亦然。LY294002、雷帕霉素、曲安奈德干预后，p110、p-Akt蛋白的表达水平下降，与对照组比较，统计学差异较大(P<0.01)；G0/G1期细胞比例均明显增加，细胞总凋亡率明显升高，与对照组比较，统计学差异较大(P<0.01)。p-Akt蛋白未见表达；总Akt无变化。3.裸鼠移植血管瘤LY294002负性调控组PI3Kp85、p-Akt阳性表达率分别为80%和86.67%，而对照组及胰岛素样生长因子正性调控组PI3Kp85及p-Akt阳性表达率均为100%。负性调控组PI3Kp85、p-Akt表达均较对照组降低（P<0.05或0.01），瘤体呈消退表现；正性调控组PI3Kp85、p-Akt表达均较对照组增高（P<0.05或0.01），血管瘤瘤体呈增生表现； PI3Kp85与p-Akt的表达呈正相关。提示：PI3K/AKT/mTOR信号通路可能参与了血管瘤内皮细胞增殖与凋亡的调节。LY294002、雷帕霉素、曲安奈德可能通过干预PI3K/Akt信号通路中相应的靶点，抑制p110激活，阻碍Akt磷酸化，使体外培养血管瘤内皮细胞停滞于G0/G1期并诱导凋亡及裸鼠移植血管瘤消退。而胰岛素样生长因子可以通过干预PI3K/Akt信号通路中相应的靶点，激活PI3K/Akt信号通路来促使瘤体增生。