上皮间质转换过程中microRNA的功能及机制研究

恶性肿瘤转移是其致死的最重要原因，上皮－间质转化(epithelial-mesenchymal transitions，EMT) 是一个细胞重编程过程，是肿瘤侵袭转移的起始事件。EMT受很多信号及表观遗传学因素的调控，其中miRNA起重要作用，目前对miRNA参与EMT调控的研究刚起步，尚缺乏系统研究。本课题以乳腺癌为研究对象，以上皮样和间质样乳腺癌细胞系为模型，通过TGF-β和EMT相关转录因子处理诱导细胞发生EMT或MET，同时选用正常乳腺及乳腺癌组织标本，用流式细胞术筛选干细胞样（间质样）CD44+CD24-细胞和上皮样CD44-CD24+细胞，miRNA芯片筛选在几个模型中存在共性的差异表达miRNAs；在细胞水平、动物水平及临床标本上研究这些miRNAs的功能；同时分析这些miRNAs的靶基因及上游调控因子，研究miRNA、靶基因和调控miRNA的因子在肿瘤侵袭转移中的作用。

恶性肿瘤转移是其致死的最重要原因，上皮－间质转化(epithelial mesenchymal transitions，EMT) 是一个细胞重编程过程，是肿瘤侵袭转移的起始事件。EMT受很多信号通路及表观遗传学因素的调控，其中miRNA起重要作用。本课题以乳腺癌为研究对象，通过转录因子Snail诱导细胞发生EMT，miRNA芯片筛选可能参与EMT 过程的miRNAs，在细胞水平、动物水平及临床标本上研究这些miRNAs的功能，分析这些miRNAs的靶基因及上游调控因子，研究miRNA、靶基因和调控miRNA的因子在肿瘤侵袭转移中的作用。通过该研究，我们发现miR-34a/c, miR-200b, miR-182, miR-548j, miR-92b等miRNAs在EMT中发挥重要作用，并参与肿瘤的侵袭转移。我们对这些miRNAs的功能、表达调控、参与的信号通路等进行了系统研究。发现miR-34通过调控Snail的表达直接参与EMT过程，miR-34/c在体内外通过其靶基因Fra-1抑制乳腺癌的侵袭和迁移；miRNA-200s通过作用于ZEB1/ZEB2而影响E-cadherin的表达，促进EMT，miRNA-200b通过Pin1-pERK/pAKT途径来调节失巢凋亡，其本身受PEA3及ELK-1的调节，形成一个正反馈环路及一个负反馈环路；发现miR-182与Snail之间存在一个负反馈调控，miR-182通过Snail参与EMT并与肿瘤侵袭转移密切相关。该研究丰富了人们对miRNAs参与EMT进而参与肿瘤侵袭转移的认识，为将来肿瘤转移的治疗奠定了理论基础。