HSPA12B基因沉默对肺癌生长和转移的抑制作用及机制研究

肺癌在我国的发病率、死亡率逐年上升，抑制血管新生有望改善患者预后，但现有相关药物疗效不理想，发现并鉴定新的血管生成抑制因子是迫在眉睫的任务。.HSPA12B是新发现的血管生成调节因子。我们前期实验发现，人肺癌组织中HSPA12B表达升高，而高表达HSPA12B可促进小鼠肺癌移植瘤生长。提示HSPA12B基因沉默可能会通过抑制血管生成从而抑制肺癌细胞的生长和转移。.本项目拟在前期工作基础上，采用HSPA12B转基因鼠、基因敲除鼠制备肺癌模型，综合评价不同表达水平的HSPA12B对肺癌生长、转移、血管新生、生存时间的影响。此外，我们拟采用血管内皮细胞培养模型，探讨Gravin- Hif1a-VEGF信号通路在HSPA12B影响血管生成中的作用，以明确HSPA12B基因沉默抑制肺癌生长和转移的机制。本研究结果将为发现肺癌生物学治疗的新靶点奠定基础。

本课题研究发现，作为一种新发现的热休克蛋白，HSPA12B显著促进小鼠肺癌生长，其机制与促进肺癌细胞增殖、减少肺癌细胞凋亡有关。此外，在本课题的支持下，我们还进行了HSPA12B在其他组织损伤中作用的延伸性研究。总结如下。.一、.HSPA12B促进体外培养的小鼠肺癌细胞增殖.来自高表达HSPA12B内皮细胞的上清，显著促进培养的Lewis肺癌细胞增殖。.二、.HSPA12B促进小鼠Lewis肺癌生长. Lewis肺癌的数量、重量在高表达HSPA12B小鼠的肺中显著增加。.三、.HSPA12B抑制Lewis肺癌组织中的肿瘤细胞凋亡.小鼠Lewis肺癌肿块中凋亡的肿瘤细胞在HSPA12B高表达转基因鼠中被显著抑制。.四、.HSPA12B升高Lewis肺癌组织中Bcl-2表达水平.小鼠Lewis肺癌肿块中的Bcl-2表达水平被HSPA12B高表达显著升高。.五、.HSPA12B增加小鼠Lewis肺癌组织中促血管生成因子表达水平.肿瘤诱导的促血管生成因子如Ang-1表达、eNOS磷酸化在HSPA12B转基因鼠中进一步升高。.六、.HSPA12B增加小鼠Lewis肺癌组织中PI3K/Akt信号活性水平.肿瘤组织中PI3K/Akt活性下降，而这种下降被HSPA12B高表达显著减轻。.七、.HSPA12B增加小鼠Lewis肺癌组织中Cox-2表达. Lewis肺癌组织中Cox-2表达增加，而这种增加被HSPA12B高表达进一步加强。.八、.Cox-2抑制剂抑制HSPA12B诱导的Lewis肺癌组织生长. HSPA12B诱导的Lewis肺癌组织生长，被Cox-2抑制剂所抑制。.九、.Cox-2抑制剂抑制HSPA12B诱导的对Lewis肺癌细胞凋亡的抑制作用. HSPA12B诱导的对Lewis肺癌细胞凋亡的抑制作用，被Cox-2抑制剂所抑制。.十、. Cox-2抑制剂抑制HSPA12B诱导的对Lewis肺癌细胞增殖的促进作用. HSPA12B诱导的对Lewis肺癌细胞增殖的促进作用，被Cox-2抑制剂所去除。.十一、.Cox-2抑制剂抑制HSPA12B诱导的促血管生成因子的表达. HSPA12B所诱导的对Lewis肺癌组织中Ang-1表达、eNOS磷酸化促进作用，被Cox-2抑制剂所去除。