基于神经营养因子调控的中药复方开心散的抗抑郁作用机理与配伍意义研究

Depression is a mental disorder disease characterized by the persistent depressed mood with high incidence rate. Current drug treatments mainly focus on the regulation of neurotransmitter release while ignore the regulation of neurotrophic factors. Therefore, not all the drug treatments are effective to the patients, and even some of them possess severe side effects. However, limited medicinies have been developed to regulate the expression of neurotrophic factors in the treatment of depression. Kai-xin-san (KXS) is a TCM formula widely used for the treatment of deprssion for thousands of years. Interestingly, the ratio was adjusted to the symptoms of depression patients. However, the concrete mechanism and the compatible principle were never elucidated. In the previous studies, it was found that KXS could increase the expression of neutrophic factors and the receptors in the brain of depressive animals,which might accout for its anti-depression effect. To have the further understanding of KXS, we aim to elucidate the mechanism, compatible principle and active components of KXS via chemical analysis, animial and cell evaluation, which will definitely be helpful for the development of potent anti-depression drugs via TCM. In addition, the current study will supply more scientific evidences to the modernization of TCM formulae.

抑郁症是一种以显著而持久的心境低落为主要临床特征的精神疾病，由于近年来发病率与患者数目迅速增长而备受关注。现有抗抑郁药物均针对神经递质调控这一单一环节，而忽略神经营养因子调控，导致有将近30%病人对现有药物无效。可是目前尚无针对神经营养因子调控的有效抗抑郁药物。开心散长期被中医临床用以治疗抑郁症，并根据辨证施治的需要调整药物剂量，形成不同配伍比例的类方。我们前期研究发现，开心散可有效促进抑郁动物脑中神经营养因子与相关受体的表达，产生显著的抗抑郁作用。因此，我们拟通过化学分析，动物模型与细胞模型评价等手段，综合研究阐明开心散调控神经营养因子系统的作用机理，以此为基础探讨开心散的配伍意义，找寻相应的物质基础，为开发治疗抑郁症的有效药物与中药复方的现代化研究提供更多的科学依据。

.本研究依据标书内容与实验进度设计，在三年的研究周期中，完成了以下内容。.首先，查阅古代文献发现，开心散最初以散剂的剂型出现，但是后世医家多以汤剂入药。因此，我们遵循中医临床用药习惯，制备了三种常用配伍比例开心散的水提物。选取单味药材具有神经活性的有效成分，利用高效液相色谱串联三重四级杆质谱，建立了提取物的含量测定方法，设立了含量范围。比较单味药材与复方中指标成分的溶出度发现，人参远志药对含量增加有助于石菖蒲茯苓药对中有效成分含量的溶出，反之亦然。全方较单味药，上述有效成分的溶出度都得以提高。此现象说明，复方的配伍并非单味药材的简单叠加。 .三种不同配伍比例的开心散组合均能提升慢性压力应激抑郁小鼠的糖水饮用量，延长强迫游泳时间，改善体重，表现出显著的抗抑郁作用，其中D-652效用最佳。该比例可通过促进神经营养因子合成酶的表达，降低降解酶的表达，显著提升海马中NGF与BDNF的含量，上调TrkA与TrkB受体转录与蛋白水平的表达，初步揭示了开心散调控神经营养因子系统抗抑郁的作用机制。.利用大孔吸附树脂分离技术对D-652进行了效用部位分离。同时采用高效液相色谱串联高分辨飞行质谱技术，对各效用部位进行了定性研究，鉴定了相应成分。.基于原代培养大鼠皮层星形胶质细胞与大鼠胶质瘤C6细胞模型，发现开心散均能促进神经营养因子表达，D-652效用最佳。该配伍比例的70%与90%洗脱部位促进神经营养因子表达效用最强。单体成分中，人参皂苷Rb1，Re，Rg1均有促进神经营养因子表达的作用，这些成分主要存在于70%与90%洗脱部位中。.此外还发现，开心散水提物具有增益神经营养因子促进神经细胞PC12分化的功能，该效用随方中石菖蒲与茯苓的用量增加而增强。.综上研究表明，开心散促神经营养因子表达与增益神经营养因子效用可能为其抗抑郁的重要机制，人参与人参皂苷可能为促神经营养因子表达作用的主要药材与成分。.