益气活血中药调节急性心肌梗死后内质网应激介导的细胞凋亡通路机理研究

Endoplasic reticulum stress (ERS) is a key pathway which decided cell apoptosis or cell survivial. So, how to regulate ERS pathway and then reverse cell apoptosis is a focus on preventing ventricular remoldeling (VR) after acute myocardial infarction (AMI). Our previous research showed that Chinese herbs could protect myocardial injury and improve VR. But it is still unknown that the mechanism is whether or not related to regulate ERS-mediated cell apoptosis pathway. This study pinpoints the key pathological circle, observes the influence of Chinese herbs on myocardial injury and gene expression of apoptosis factors mediated by ERS in vivo and in vitro research, and then reveals molecular mechanisms of VR and explains the mechanisms of Chinese herbs on protecting myocardial injury and preventing VR. The relevant research has not been reported. So, this study aims to deepen VR research after AMI and explain the complex molecular mechanisms of Chinese herbs on VR, which is of vital significance to promote the application of Chinese herbs on the secondary prevention of AMI.

内质网应激（ERS）是决定细胞凋亡或存活的一个重要途径，如何调节ERS介导的细胞凋亡通路，进而逆转心肌细胞转向衰竭是目前防治急性心肌梗死（AMI）后心室重构（VR）的焦点。我们研究表明，益气活血中药可保护AMI后心肌损伤、改善VR，其作用机理是否和调控ERS介导的细胞凋亡通路有关？目前尚不清楚。本课题针对AMI后这一关键病理环节，通过在体AMI大鼠模型和离体缺氧心肌细胞损伤模型，动态观察益气活血中药干预AMI后心肌损伤程度和ERS相关凋亡因子基因蛋白表达的变化，揭示VR发生发展的分子机制，阐释益气活血中药通过调节ERS介导的细胞凋亡通路保护心肌细胞损伤和预防VR的的作用机理，有关研究尚未见有报道。因此，课题对深化AMI后VR的研究，阐释中医药干预AMI后VR多环节整合作用的复杂分子机理，促进中医药在AMI后二级预防的应用，均具有十分重要的意义。

项目背景：内质网应激（ERS）是决定细胞凋亡或存活的一个重要途径，如何调节ERS介导的细胞凋亡通路，进而逆转心肌细胞转向衰竭是目前防治急性心肌梗死（AMI）后心室重构（VR）的焦点。.研究内容：观察益气活血中药干预AMI后心肌损伤程度和ERS相关凋亡因子基因蛋白表达的变化，阐释其通过调节ERS介导的细胞凋亡通路保护心肌细胞损伤和预防VR的的作用机理。.研究结果：在体研究：（1）AMI后ERS即刻启动：与假手术组比较，各组抗ERS和促ERS信号通路相关因子均明显表达；（2）AMI后细胞凋亡信号通路呈动态演变：AMI后ERS介导的促细胞凋亡通路的相关因子如：CHOP、Caspase-12、BIP、puma等表达明显升高，抗细胞凋亡信号因子CRP78和GADD34也在AMI后即刻上调，呈动态演变趋势；（3）益气活血中药可调节AMI后细胞凋亡信号通路：与模型组比，各用药组不同程度下调促细胞凋亡信号通路因子CHOP 、BIP、PUMA和 caspase-3 和Caspase-12等的基因和蛋白表达（P<0.05），以益气活血配伍组效果为佳。与模型组比较，各用药组不同程度上调CRP78和GADD34基因和蛋白表达（P<0.05），各中药组疗效相当，均优于缬沙坦组（P<0.05）。（4）益气活血中药可以保护心肌细胞内质网相对完整性，减少心肌细胞凋亡，保护心脏结构和功能；与模型组相比，各用药组射血分数均不同程度提高，BNP水平不同程度下降，心肌细胞凋亡指数明显下降（P<0.05）。离体研究：（1）益气活血组分配伍可以调节缺氧心肌细胞ERS介导的细胞凋亡通路：与模型组比，各用药组不同程度下调促细胞凋亡信号通路因子CHOP 、BIP、PUMA，caspase-3 和Caspase-12等的基因和蛋白表达（P<0.05），各中药组疗效相当；与模型组比较，各用药组不同程度上调GRP78和GADD34基因和蛋白表达（P<0.05），以西洋参组效果为佳。（2）益气活血组分配伍对缺氧心肌细胞凋亡和ER形态的影响：各中药组对缺氧/复氧造成心肌细胞的凋亡具有显著抑制作用（P<0.05），以益气活血配伍组效著（P<0.01）。.科学意义：本课题对深化AMI后VR的研究，阐释中医药干预AMI后VR多环节整合作用的复杂分子机理，促进中医药在AMI后二级预防的应用，均具有十分重要的意义。