益气养阴活血中药对胰岛β细胞脂凋亡的作用

β细胞凋亡是β细胞功能下降，导致2型糖尿病的主要原因。β细胞的凋亡是脂毒性和糖毒性两者共同作用的结果；β细胞的脂凋亡很可能是导致高血糖的一个始动因素而并非继发于高血糖的后果。因此，进行有效的干预可能遏制或延缓β细胞的凋亡，从而有助于延缓2型糖尿病的发生与发展。本课题拟探讨益气养阴活血中药以对"脂毒性"导致的胰岛细胞脂凋亡的作用。通过在体动物实验和离体胰岛细胞培养观察高脂作用下胰岛细胞的分泌功能和凋亡率，研究益气养阴活血中药对胰岛细胞脂凋亡的抑制作用。并通过细胞凋亡蛋白/基因的相关性研究，阐述益气养阴活血中药的作用靶点及影响的途径，证实其抑制胰岛细胞脂凋亡，改善胰岛分泌功能有可能是通过调节细胞凋亡相关Caspase-3蛋白和/或 Bax、Bcl-2基因的表达实现的。为益气养阴活血中药防治糖尿病提供新的实验依据。

该项目在临床研究中发现：血瘀证与非血瘀证2型糖尿病患者血清游离脂肪酸水平、游离脂肪酸谱组成以及血浆代谢组分均存在差异。造成游离脂肪酸谱差异的主要因素是中长链饱和脂肪酸，血清游离脂肪酸谱和血瘀证症候积分以及糖尿病大血管病变存在相关关系，饱和脂肪酸是血瘀证症候积分的危险因素；同时，血瘀证2型糖尿病患者存在更严重的脂代谢紊乱，和能量代谢障碍，在氨基酸代谢途径中也存在差异。因此，脂毒和血瘀在2型糖尿病患者中存在相关关系，二者相互影响，均是2型糖尿病发生与进展中的重要病理生理变化过程。该项目在基础研究中发现：具有益气养阴活血的中药方剂活血降糖饮对脂毒性损伤的治疗作用具有多靶点，多作用机制的特点，其对脂毒性所致大鼠胰岛素抵抗、高脂血症、β细胞凋亡和胰岛素分泌障碍等多个病理生理改变均具有一定治疗作用，具体作用机制如下：（一）活血降糖饮对脂毒性所导致的大鼠胰岛素抵抗和高脂血症的治疗可能与调节肝脏GLP-1R、GLUT-4和脂肪GLUT-4蛋白表达相关。（二）活血降糖饮预防脂毒性所致大鼠胰岛细胞凋亡的作用可能与调节胰腺Bcl-2和Bax蛋白表达有关。（三）经长时间高脂高热卡饮食喂养以及经活血降糖饮治疗后，大鼠胰腺蛋白质组发生改变，发生改变的蛋白可能主要参与脂肪酸转运和脂肪酸氧化。（四）活血降糖饮含药血清对脂毒性所致INS-1细胞高糖+GLP-1刺激后的胰岛素分泌缺陷的治疗作用可能与增加GLP-1R、Epac-2、Akt、pAkt（Ser473）蛋白表达和细胞内cAMP含量有关。