具有免疫抑制活性的二萜类化合物的结构修饰及活性研究

中药豨莶草为常用中药,我们通过研究生课题，"八五"、"九五"攻关课题和国家自然基金项目的研究，现已从三个种植物分得六十余个化合物，主要为二萜类化合物。现已证明其水煎剂对小白鼠细胞免疫、体液免疫和非特免疫均有抑制作用，同时发现其二萜类成分有明显的免疫抑制和抗炎作用。本课题的主要研究目的是通过对已经发现具有免疫抑制活性的二萜化合物为母核进行引入系列基团的化学结构修饰，以增强药理活性和进一步进行免疫抑制活性的筛选研究，发现毒性低，活性强的二萜类免疫抑制的先导化合物。具有一定选择性的免疫抑制剂日益受到关注，特别是从毒性较小中药中发现新的免疫抑制成分，研究其构效关系，为深入研究发现新的免疫抑制剂作一些前期的基础性理论和探索性工作，为进一步开发免疫抑制药物奠定基础。

本项目课题按照实验计划顺利实施，基本达到了预期目标。.本项目对传统抗风湿中药腺梗豨莶中具有免疫抑制活性的二萜类化合物奇壬醇(Kirenol)进行了结构修饰及构效关系研究，同时对奇壬醇抗炎活性作用机理及药物代谢动力学进行了研究。.奇壬醇分子结构中有四个羟基和一个双键，双键位于结构中8 (14)位，四个羟基位于C2, C15, C16, C19位，这些基团可进行多种的化学反应。拟采用引入活性基团的方法增强其免疫抑制、抗炎和镇痛的活性。从实验应用的角度考虑，先导化合物的修饰应遵循最少修饰准则，对分子结构分段、分步进行修饰的原则。我们首先对C2、C19、C15、C16位上的羟基进行修饰，所得衍生物进行免疫抑制活性的筛选，以获得高效低毒的化合物。.目前通过邻二羟基保护、羟基酯化、氧化、还原等反应共计得到67个衍生物。对所得衍生物进行了淋巴细胞转化抑制实验及NO生成抑制活性测定，通过分析药理结果对奇壬醇药理活性构效关系进行了初步总结探讨。.同时，本课题对奇壬醇的药理活性作用机理进行了研究，发现奇壬醇可降低佐剂性关节炎大鼠足肿胀指数，抑制佐剂性关节炎大鼠踝关节滑膜细胞增生，减少衬里下层炎性细胞浸润，改善踝关节滑膜病变；同时奇壬醇可调整小鼠机体免疫功能，通过降低大鼠血清炎症因子PGE2、IL-1β、IL-6水平，升高IL-2水平，抑制踝关节滑膜细胞COX-2活化，调节凋亡蛋白Bcl-2、Fas-L表达，从而减轻佐剂性关节炎大鼠踝关节滑膜炎病变。.另外，本项目研究了奇壬醇在大鼠体内的组织分布及体外CYP450代谢情况。研究结果表明灌胃给药后，奇壬醇在大鼠心、肝、脾、肺、肾、肠中均有分布，其中以肝、肠中奇壬醇浓度最高；奇壬醇在大鼠各组织中的Tmax与血药浓度Tmax接近，各组织中药物浓度达峰后很快下降，表明其在组织中分布快消除也快；奇壬醇在大鼠体内主要分布在肝、肠，脑中没有分布，可能是由于其不能通过血脑屏障或其不以原型物形式分布于脑；奇壬醇在人、犬、大鼠三个种属体外微粒体中代谢稳定，人和犬肝微粒体中奇壬醇半衰期相近，其代谢活动较相似；在若干同工酶中，CYP3A4、CYP2C9、CYP2D6、CYP1A2、CYP2A6和CYP2E1可明显参与奇壬醇的代谢。