抗汉滩病毒人源抗体基因的克隆与表达

本项目自人hpBLs以人抗体通用引物通过3种方法扩出了人抗体Vn(约35Obp)、Vr和Vx（32Obp）。以SOE反应构建了Vn-（G4S），-Vn分子（ScFv），将ScFv、Vn与PHENI重组构建了人源性全套ScFv和VR两种噬菌体表面呈现文库，从中以Panning方法筛选出了抗HTV和ScFv和VH抗体片段，进行了活性鉴定。测序证实ScFv长度为735bp、VH为345bp,分析了高、低活性克隆测序结果而确定了几个影响抗体活性的氨基酸序列。最后进行了分泌型表达。研究内容在VH文库、分泌型表达、关键氨基酸序列分析等方面超出了原申请书，最终获得了ScFv、VH两种抗HTV的活性较好的人源性抗体片段。本研究在抗HTV抗体的人源性、噬菌体抗体及序列分析等方面已达国际先进水平，对EHF的防治，诊断及科研都有重要的意义。