PD-1/PD-L1信号通路在细粒棘球蚴感染中的免疫负调控作用研究

细粒棘球蚴病为严重的动物源性寄生虫病，我国西部为主要病区，本病的预防和治疗均很困难，很有必要研制有效疫苗。近年研究表明PD-1/PD-L通过负调控免疫应答，在免疫耐受、病原体感染及肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用，但其在包虫病的作用尚未阐明。本课题以PD-1/PD-L1通路的免疫负调节作用为切入点，研究手术前后及临床转归包虫病患者的PD-1/PD-L1变化规律，观察棘球蚴感染小鼠PD-1/PD-L1在感染不同阶段的动态变化，及体外抗原刺激对淋巴细胞增殖的影响，通过特异性抗体阻断PD-1/PD-L1信号通路，明确PD-1/PD-L1通路与棘球蚴感染的关系，探讨PD-1/PD-L1通路在患者和动物模型的免疫逃避形成上起到的作用及其可能的机制；同时探讨EgB抗原和EG95疫苗对PD-1/PD-L1通路的调节作用，对提高疫苗保护性效果和深入开展以负性共刺激分子为靶点的免疫防治包虫病研究提供一个新的方向。

棘球蚴病是新疆牧区的严重人畜共患病，为了探讨其发病机制，本课题开展了PD-1/PD-L1信号通路及其相关细胞因子在棘球蚴感染的临床病人和棘球蚴感染小鼠中的作用机制研究。流式细胞术检测结果显示CD4+CD25+PD-1+ T细胞与CD11c+MHCⅡ+PD-L1+DC细胞在棘球蚴感染动物的不同时期有不同的变化特点。在棘球蚴感染早期未见明显表达，感染中晚期，两类细胞均维持相对高水平表达，PD-1/PD-L1调节Treg免疫抑制功能参与棘球蚴的免疫逃避。棘球蚴感染中，PD-1/PD-L1促进CD4+CD25+Treg细胞分泌抑制性细胞因子TGF-β和IL-10发挥抑制作用。sPD-L1可促进PD-1/PD-L1通路的免疫负调控作用。PD-1/PD-L1通路发挥免疫抑制作用主要通过诱导Th1/Th2免疫应答失衡、诱导Tregs的增殖分化及刺激分泌抑制性细胞因子TGF-β和IL-10等，不利于宿主肝脏棘球蚴感染的清除，造成持续性感染。进一步检测棘球蚴感染的临床病人血中循环CD4+ CXCR5+ Tfh细胞的PD-1和血清中抗体类型，初步发现当Tfh高表达PD-1时，活动性包虫病患者外周血中IgG4型抗体明显增加，发现无论是循环PD-1+Tfh还是其相关细胞因子均与棘球蚴病发生发展明密切相关。PD-1/PD-L1通路及其相关分子的表达增高有助于棘球蚴发生免疫逃避现象。